Грамотрицательные кокки. Грамотрицательные кокки семейства Neisseria менингококки гонококки Возбудители негонококковых

Ходить к врачу не любят большинство людей. Остальные — не любят очень сильно. Все великолепно понимают, что без этого нельзя, все время от времени болеют и нуждаются во врачебной помощи, но вот не любят люди ходить по кабинетам поликлиник и по больничным коридорам, и все тут.

И все же абсолютно независимо от желаний и предпочтений каждого отдельного человека есть такие врачи и существуют такие анализы, обойти которые никак не получится. Если, например, с эндокринологом или с аллергологом есть шанс не встретиться ни разу за всю жизнь, то с терапевтом или с гинекологом встречи регулярны и неизбежны. А любая встреча с гинекологом влечет за собой сдачу анализов — хотя бы, как минимум, сдачу мазка.

Что такое мазок?

Женские внутренние половые органы обязательно покрыты слизистой оболочкой, а состояние этой слизистой оболочки и состояние слизи могут немало рассказать о женской репродуктивной системе.

Флора женского влагалища позволяет сделать выводы о наличии или об отсутствии болезнетворных грибов, относящихся к роду Candida , которые становятся причиной всем известной молочницы, самых разных бактерий или простейших, которые становятся причиной очень большого количества заболеваний; также по результатам мазка можно выяснить, не появились ли раковые клетки, в каком состоянии находятся ткани влагалища и даже оценить состояние гормонального фона.

Мазок — процедура совершенно безболезненная и очень кратковременная, однако результаты мазка дают довольно точно представление о здоровье женщины. И любое обследование женского здоровья начинается именно с влагалищного мазка.

Гинекологические мазки бывают разными — их четыре типа: мазок на флору (самый распространенный), мазок на стерильность, мазок на цитологию шейки матки (тест на так называемые атипичные клетки) и мазок для выявления скрытых инфекций по методу ПЦР (полимеразной цепной реакции).

Что может показать мазок на флору и на стерильность?

Мазок на флору нужен для того, чтобы выявить во влагалище болезнетворные микроорганизмы и/или бактерии, которые становятся причиной воспалительных процессов. Также такой мазок дает достаточно полное представление о количестве бактерий-вредителей.

Если женщина здорова и никаких патологических процессов в ее организме не происходит, результатом мазка на флору должен стать высокий (95 %) показатель наличия лактобактерий, благодаря которым во влагалище поддерживается нужная кислотность и влагалище защищается от инфицирования. Если количество лактобактерий падает, защита немедленно ослабевает.

Внимание! Лактобактерии имеют и другие названия, среди которых часто употребляются названия грамположительные палочки, или палочки Додерлейна.

В случае наличия в результатах мазка палочек Додерлейна (грамположительных палочек), то есть лактобактерий, следует понимать, что со здоровьем половой сферы все нормально. А вот если этих палочек нет вообще или их мало, то это плохо: значит, есть какая-то другая «живность», которая полезные палочки вытеснила. В таких случаях необходимо сначала обнаружить инфекцию, вылечить ее, а затем приложить все усилия для восстановления нормальной флоры.

Палочки Додерлейна очень важны для поддержания нормальной кислотности влагалища, от которой зависит и так называемая степень чистоты влагалища (всего таких степеней четыре).

Первая степень чистоты свидетельствует о здоровом влагалище и о здоровой половой системе. В таком случае в мазке выявляется очень много палочек Додерлейна (лактобактерий), которые и обеспечивают нормальную для здорового влагалища кислую среду (рН 4,0-4,5). Также в мазке могут обнаруживаться эпителиальные клетки (в небольшом количестве) и совсем немного лейкоцитов (буквально парочка штук в поле зрения на предметном стекле).

Вторая степень чистоты влагалища должна вызвать некоторую обеспокоенность, потому что в мазке (соответственно, во влагалище), кроме палочек Додерлейна (лактобактерий), они же грамположительные палочки, появляются и грамотрицательные бактерии, которые с высокой долей вероятности (чаще всего) оказываются возбудителями инфекционного процесса. Кислотность влагалища постепенно повышается (рН 4,5-5,0), хотя еще и не считается критичной. Однако инфекцию уже надо лечить, пока она находится только в начальной стадии.

Третья степень чистоты влагалища вызывает серьезную тревогу и обеспокоенность, поскольку в мазке очень много эпителиальных клеток, много так называемой бактериальной микрофлоры, а вот лактобактерий почти нет. Кислотность влагалища становится щелочной или иногда предельно слабокислой (рН 5,0-7,0).

Внимание! Третья степень чистоты мазка считается плохим результатом и свидетельствует о необходимости серьезного лечения.

Четвертая степень чистоты не просто тревожит — организм в опасности! Палочек Додерлейна (лактобактерий) в мазке нет вообще, даже единичных. О кислой реакции мазка можно пока забыть, потому что реакция однозначно щелочная (рН 7,0-7,5). Вся флора мазка — болезнетворные микроорганизмы и бактерии, поле зрения покрывают лейкоциты, что подтверждает наличие воспалительного процесса.

Внимание! Четвертая степень чистоты мазка считается очень плохим результатом и свидетельствует о необходимости незамедлительного серьезного лечения, которое может оказаться и сложным, и длительным.

Виновниками обнаруженного во влагалище воспалительного процесса могут оказаться, например, трихомонады или гарднереллы, но некоторые возбудители при помощи микроскопа обнаружить невозможно, поэтому может понадобиться еще и анализ при помощи ПЦР (полимеразной цепной реакции).

Также в мазке может обнаружиться кандида (дрожжеподобные грибы), однако грибов не должно быть много: если их количество исчисляется не единицами, а десятками, то это уже становится проблемой, требующей немедленного лечения.

Что касается остальных показателей, которые фиксируются в результатах исследования мазка, то, хотя полную интерпретацию результатов может сделать только лечащий врач, не мешает иметь о них хотя бы некоторое представление.

Эпителиальные клетки (плоский эпителий) — это клетки слизистой оболочки, которые в незначительном количестве должны попадать в мазок: материал для мазка «смазывается» со слизистой, поэтому отдельные клетки тоже должны смазаться. Если эпителиальных клеток в мазке нет совсем, то следует озаботиться своим гормональным статусом. Если же эпителия много, то это еще раз подтверждает наличие воспалительного процесса.

Лейкоциты — это белые кровяные клетки, которые выполняют в организме защитные функции. Наличие лейкоцитов в мазке свидетельствует только о том, что в организме есть воспалительный процесс и лейкоциты начали борьбу с чужеродными элементами.

Нормальным показателем лейкоцитов для влагалищного мазка считается десять лейкоцитов в поле зрения, однако есть врачи, которые тут же задаются вопросом, откуда эти лейкоциты взялись, даже если их немного. В идеале их бы и вообще быть не должно. Но если в мазке есть много лейкоцитов, необходимо устанавливать причину воспаления и лечить эту причину.

Если в мазке появляются эритроциты (красные кровяные тельца), то это может свидетельствовать об одной из трех причин: мазок взят во время месячных (бывает и такое); слизистая оболочка влагалища была травмирована (даже просто неосторожно задели гинекологическим зеркалом); влагалище воспалено (необходимо выяснять причину воспаления и начинать лечение).

Обычно в мазке может быть некоторое количество слизи , поскольку мазок берется со слизистой оболочки влагалища. Однако же слишком большое количество слизи должно насторожить: по крайней мере, должен появиться вопрос, откуда эта лишняя слизь взялась.

Дрожжеподобные грибы рода Candida живут практически в любом организме, но их количество в нормальных обстоятельствах весьма ограничено. Когда же в организме случается какой-то сбой, то Candida начинают очень активно размножаться, вызывая крайне неприятное заболевание под названием молочница (она же кандидоз).

Внимание! В норме во влагалище может быть до сорока разных видов бактерий, однако их размножение сдерживается и регулируется палочками Додерляйна (лактобактериями), которые должны преобладать в здоровой флоре.

Несколько слов о кокковой флоре

Кокки в мазке ни о чем хорошем никогда не говорят и это всегда не очень хорошая новость.

Выглядят кокки вполне мирно — как шарики или как кофейные зернышки, однако на этом их «мирность» заканчивается.

Очень распространена в мире стафилококковая инфекция , которую могут вызывать несколько микроорганизмов. К счастью, из известных на сегодняшний день 27 видов стафилококков на человеческих слизистых оболочках и на коже можно обнаружить только 14, из которых стать причиной заболевания могут только три, однако счастье это весьма относительно, поскольку даже три болезнетворные вида стафилококков способны причинить достаточно много весьма серьезного вреда — вплоть до летальных исходов.

Доказано, что практически все новорожденные инфицируются , но позже стафилококк постоянно присутствует только у 20 % населения земного шара (в носоглотке), еще 60 % людей становятся носителями стафилококка время от времени, и только у 20 % настолько сильный, что стафилококк остается не у дел.

Когда говорят о стафилококке, чаще всего речь идет о золотистом стафилококке, и он действительно опасен, потому что достаточно устойчив и к действию антисептиков, и даже к действию антибиотиков. Золотистый стафилококк может стать причиной более сотни очень опасных заболеваний, причем в зону риска попадают абсолютно все.

Золотистый стафилококк очень активен и чрезвычайно устойчив ко внешним воздействиям. Например, он сохраняет активность (соответственно, опасность) после пребывания под прямыми солнечными лучами в течение 12 часов и даже температуру 150 °С способен выдерживать (правда, не более десяти минут).

Золотистый стафилококк не уничтожается ни чистым этиловым спиртом, ни перекисью водорода, ни раствором натрия хлорида. Вызывает же эта бактерия и несложные кожные воспаления, и пневмонию, и эндокардит, и остеомиелит — вплоть до летального исхода. Способен золотистый стафилококк поражать и слизистые оболочки женской половой системы, и инфекция эта считается довольно сложной и неприятной.

В мазке может быть и другая разновидность кокковой флоры — стрептококки , которые известны как грамположительные бактерии. Стрептококков в мазке быть, конечно, не должно, однако единичные стрептококки особой опасности не представляют и могут считаться вариантом нормы.

Стрептококк, который обнаружен в мазке а единичных количествах, тоже относится к условно патогенной микрофлоре, и лечение необходимо только при увеличении количества стрептококков.

Достаточно неприятным может оказаться обнаружение в мазке энтерококка — грамположительной бактерии, которая свойственна для микрофлоры желудочно-кишечного тракта, но не влагалища.

Энтерококк достаточно устойчив к любым воздействиям, а его наличие в мазке (особенно в существенных количествах) свидетельствует о воспалительных процессах органов малого таза и мочеполовой системы. Хотя единичные энтерококки в мазке тоже могут считаться условно патогенной микрофлорой, что требует тщательного наблюдения и контроля.

А самый неприятный представитель кокковой флоры — печальноизвестный . Это грамотрицательная бактерия вызывает воспалительные заболевания мочеполовой системы, включая гонорею, которая относится к заболеваниям, передающимся половым путем (ЗППП); воспалительные процессы в мочеиспускательном канале, в прямой кишке, в шейке матки и в маточных трубах.

Гонококков в мазке быть не должно! Гонококк в мазке свидетельствует не просто о воспалительном процессе, а о наличии заболевания, передающегося половым путем, то есть о гонорее.

Внимание! В случае гонореи самолечение недопустимо категорически! Это опасно для здоровья не только носителя инфекции, но и для его партнеров.

Кокковая флора лечится только с применением антибиотиков. Причем следует хорошо понимать, что недолеченные кокки становятся устойчивыми не только к конкретному лекарству, но и ко всей группе препаратов. Поэтому лечить воспалительные процессы, причиной которых стало инфицирование кокковой флорой, необходимо очень тщательно и доводить лечение до конца, выполняя все рекомендации лечащего врача.

Внимание! С случае любой кокковой инфекции самолечение недопустимо: подбор необходимых антибиотиков и сопровождающей терапии может осуществить только врач на основании результатов всех необходимых клинических анализов.

Подводя итоги, можно сказать, что палочки в мазке — это палочки Додерлейна, которые необходимы для поддержания нормальной кислотной среды во влагалище и для противостояния инфекциям. Палочки исчезают только тогда, когда уже не способны справиться с воспалительным процессом.

Кокки же, хоть их опасность и неравнозначна, — весьма нежелательный элемент, который может появиться в результатах мазка и который в любой момент может стать причиной воспалительного процесса. Особую опасность как патогенная микрофлора представляют гонококки, вызывающие гонорею — социально опасное и передающееся половым путем заболевание половых органов.

Методическое указание для студентов к практическому занятию № 25

Тема: Грамотрицательные кокки (менингококки и гонококки).

Цель: Освоение методов микробиологической диагностики заболеваний, вызванных менингококками и гонококками.

Модуль 2. Специальная, клиническая и экологическая микробиология.

Тема занятия 25. Микробиологическая диагностика заболеваний, вызванных менингококками и гонококками.

Актуальность темы. Отдел Gracilicutes , семейство Neisseriaceae , род нейссерий (Neisseria). Все виды семейства являются обитателями слизистых оболочек теплокровных. Общие признаки бактерий этой группы:

• способны расти в присутствии кислорода,
• представлены неподвижными диплококками и короткими палочками, отрицательно окрашивающимися по Грамму,
• спор не образуют.

Нейссерии – грамотрицательные аэробные кокки, включающие 8 видов, наиболее патогенные для человека виды нейссерий – Neisseria meni n gitidis (менингококки) и Neisseria gonorrhoeae (гонококки). 7 видов встречается у человека, из них 55 видов являются представителями нормофлоры носоглотки и верхних дыхательных путей.

Морфология. Грамотрицательные неспорообразующие кокки, неподвижны, образуют пары или тетрады. Некоторые виды имеют капсулу и микроворсинки.

Культуральные свойства. Аэробы, хемоорганотрофы. патогенные виды прихотливы к условиям культивирования, не растут на обычных питательных средах. Виды, обитающие в носоглотке, образуют желтый пигмент на плотных средах с добавлением куриного желтка.

Ферментативная активность низкая, особенно у патогенных видов.

Антигенная структура – все виды имеют полисахаридный соматический О-антиген; штаммы, образующие капсулу, также имеют капсульный антиген.

Факторы патогенности: капсула, пили, эндотоксин, поверхностные белки наружной мембраны.

Устойчивость в окружающей среде низкая, чувствительны к действию обычно применяемых антисептиков и дезинфектантов.

Менингококк. Neisseria menigitidis

Менингококковая инфекция — инфекционная болезнь, вызываемая Neisseria meningitidis, проявления которой варьируют от бессимптомного носительства до тяжелейших менингеальных форм. Возбудитель впервые подробно изучен в 1887 г. А.Ваксельбаумом.

Таксономия. Возбудитель относится к отделу Gracilicutes, семейству Neisseriaceae, роду Neisseria.

Морфология и тинкториальные свойства. Менингококки — мелкие диплококки. Характерно расположение их в виде пары кофейных зерен, обращенных вогнутыми поверхностями друг к другу. Менингококки неподвижны, спор не образуют, грамотрицательны, капсула непостоянна, имеют пили.

Культивирование. Аэробы культивируют на средах, содержащих нормальную сыворотку либо дефибринированную кровь барана или лошади, а также на селективной среде с ристомицином. Повышенная концентрация СО 2 стимулирует рост менингококков.

Антигенная структура . По капсульным антигенам менингококки делятся на основные серогруппы А, В, С, D и дополнительные. По антигенам клеточной стенки подразделяют менингококки на серовары (1, 2, 3 т.д.). Во время эпидемических вспышек обычно циркулируют менингококки группы А. Токсин менингококков представляет собой липополисахарид клеточной стенки. Его количество определяет тяжесть заболевания.

Резистентность . Менингококки малоустойчивы в окружающей среде, чувствительны к высушиванию и охлаждению. Чувствительны к пенициллинам, тетрациклинам, эритромицину, устойчивы к ристомицину и сульфамидам.

Патогенез и клиническая картина . Человек – единственный естественный хозяин менингококков. Носоглотка является входными воротами инфекции. Здесь бактерии могут длительно существовать, не вызывая воспаления (носительство), но иногла становятся причиной назофарингита. Из носоглотки они могут попадать в кровяное русло (менингококкемия) с развитием лихорадки и геморрагической сыпью. Наиболее частым осложнением менингококкемии является менингит или менингоэнцефалит (воспаление мозговых оболочек).

Иммунитет. Постинфекционный иммунитет при генерализованных формах болезни стойкий, напряженный.

Для лабораторной диагностики исследую кровь, спинномозговую жидкость, слизь с носоглоточных тампонов. При микроскопическом исследовании осадка центрифугированной спинномозговой жидкости и мазков из зева видны типичные нейссерии внутри нейтрофилов или внеклеточно. Посев материала производят сразу после взятия на кровяной агар (шоколадный агар), агар с ристомицином (или линкомицином), среду Мартена – агар с антибиотиками (ВКН – ванкомицин, колистин, нистатин). Инкубацию проводят в атмосфере, содержащей 5% углекислого газа.

Лечение. В качестве этиотропной терапии используют антибиотики: пенициллин, левомицетин, рифампицин.

Профилактика. Разработана менингококковая химическая полисахаридная вакцина, которая проходит апробацию.

Гонококк . Neisseria gonorrhoeae

Гонорея – инфекционное венерическое заболевание, вызываемое Neisseria gonorrhoeae , характеризующееся гнойным воспалением слизистых оболочек органов мочеполовой системы.

Возбудитель гонореи – гонококк, открытый А. Нейссером в 1879 г., относится к семейству Neisseriaceae , отделу Gracilicutes ; вызывает также острое гнойное воспаление слизистой оболочки глаза – бленнорею.

Морфология и культивирование . Гонококк – грамотрицательный диплококк бобовидной формы, неподвижен, спор не имеет, капсулы не образует . В гнойном отделяемом типичное расположение гонококков внутри лейкоцитов (незавершенный фагоцитоз).

Электронная микроскопия.

Характерная, используемая как важный критерий диагностики форма гонококка - диплококк (парный кокк), реже - тетракокк. Связана с особенностями деления гонококка. Диплококк сравнивают с кофейными зёрнами или почками, обращёнными вогнутыми сторонами друг к другу.

Гонококк – аэроб, выращивается на питательных средах, содержащих сыворотку, кровь или асцитическую жидкость. Оптимальные условия для культивирования – t =37 0 C и повышенная концентрация углекислого газа. Гонококк обладает слабой сахаролитической активностью.

Антигенная структура и факторы патогенности. Антигенная структура изучена мало. Фактором патогенности является токсическая субстанция клеточной стенки – липополисахарид.

Резистентность. Гонококк отличается высокой чувствительностью к высушиванию, дезинфицирующим средствам, температуре; чувствителен к бензилпенициллину, эритромицину, тетрациклину, доксициклину, цефалоспоринам, бесиптолу.

П атогенез . Чаще всего гонорейная инфекция проявляется воспалением слизистых оболочек, сопровождающееся гнойными или слизисто-гнойными выделениями из мочеиспускательного канала (уретры) у мужчин, из уретры и шейки матки у женщин. Вызванная нейссериями инфекция у женщин протекает более стёрто, несмотря на это, приводя к серьёзным осложнениям. Так, при обследовании бесплодных женщин не столь уж редко обнаруживается скрыто протекающая гонорейная инфекция.

Источником заражения чаще являются больные с хроническими, малосимптомными формами гонореи, которые не считают имеющиеся у них симптомы свидетельством венерического заболевания.

Микробиологическая диагностика. Основной метод диагностики – бактериоскопия препаратов гнойного отделемого, окрашенных по Грамму и метиленовым синим. При отсутствии результатов бактериоскопии используют бактериологический метод.

Характерные признаки гонореи при бактериоскопии ("в мазке"): внутриклеточно расположенные, грамотрицательные, диплококки, причём каждый из кокков имеет бобовидную форму.

Бактериоскопия весьма эффективна при острой гонорее, при качественной подготовке больного к исследованию, правильном взятии материала . В случае отрицательного результата показано повторное исследование в течение 3 последующих дней с использованием провокации. Из каждого очага для бактериоскопии берут мазки на два стекла: один для ориентировочного исследования после окраски метиленовым синим, другой - для окраски по Граму , что позволяет дифференцировать грамположительные и грамотрицательные микроорганизмы.

Культуральный метод ("посев" ) применяется при неоднократном получении отрицательного результата при бактериоскопическом исследовании при подозрении на гонорею, наличии в мазке подозрительных на гонококк микроорганизмов, установлении излеченности гонореи ("контроль излеченности"), подтверждение гонорейного процесса у детей и обследование больных трихомониазом после лечения .

В последнее время возрастает значение молекулярно-биологических методов для диагностики гонореи. Особенно ценен метод ПЦР для выявления хронической, стёртой, вялотекущей, лечёной гонореи, когда меняются свойства гонококка и, вызывая патологические процессы в организме, он тем не менее "отказывается" расти на питательных средах, и тем самым, "выдавать" себя. В последнее время ПЦР-диагностику стали использовать для идентификации штаммов микроорганизмов с генетической устойчивостью к антибиотикам (тетрациклину, эритромицину), что представляет серьёзную эпидемиологическую проблему. Официально разрешено применение метода ПЦР в выявлении гонококков , хламидий, микоплазм, уреаплазм и т.д.

Лечение – сочетают назначение антибактериальных препаратов (желательно, с учётом чувствительности гонококков к ним, что определяется по результатам "посева") и средств, стимулирующих иммунитет. Лечение беременных проводят в стационаре с учётом влияния антибиотиков на плод. При хронической гонорее вводят убитую гонококковую вакцину с целью иммунотерапии.

Профилактика . Специфическая профилактика отсутствует.

Конкретн ые цели:

Ознакомиться с биологическими свойствами и классификацией вида Neisseria menigitidis.

Изучит методы микробиологической диагностики менингококковых заболеваний и бактерионосительства.

Ознайомиться с биологическими свойствами вида Neisseria gonorrhoeae и их патогенностью для человека.

Описывать патогенез острой и хронической гонореи.

Выучить методы микробиологической диагностикик гонореи.

Ознакомиться с методами профилактики и специальной терапии гонореи и бленнореи.

Уметь:

Проводить дифференциацию менингококков и грамотрицательных диплококков носоглотки.

Забирать материал для исследования от больных с заболеваниями, вызванными менингококками и гонококками.

Выделять чистые культуры нейссерий.

Трактовать результаты микроскопического исследования нативных препаратов.

Трактовать результаты серологического исследования сыворотки больных на гонорею (РСК).

Теоретические вопросы:

Семейство Neisseriaceae . Род нессерий (Neisseria).

• Биологические свойства.
• Классификация.
• Э волюция патогенности.

Менингококки (Neisseria menigitidis).

• Биологические свойства, классификация.
• Патогенез и микробиологическая диагностика менингококковых заболеваний и бактерионосительства.
• Дифференциация менингококков и грамотрицательных диплококков носоглотки.

Гонококки (Neisseria gonorrhoeae).

• Биологические свойства.
• Патогенность для человека, изменчивость.
• острая и хроническая гонорея.
• И ммунитет. Микробиологическая диагностика гонореи.
• Профилактика и специальная терапия гонореи и бленнореи.

Практические задания, используемые на занятии:

Микроскопия микропрепаратов из чистых культур нейссерий, их анализ и зарисовывание в протокол.

Микроскопия демонстрационных микропрепаратов: мазок из уретры больного гонореей (окраска метиленовым синим), мазок из уретры больного гонореей (окраска по грамму), менингококк в спинно-мозговой жидкости (окраска по Грамму).

Зарисовывание демонстрационных микропрепаратов в протокол.

Оформление протокола .

Литература:

1. Пяткин К.Д., Кривошеин Ю.С. Микробиология с вирусологией и имму-нологией.– Киев: Высшая школа, 1992.- 431с.

2. Воробьев А.В., Быков А.С., Пашков Е.П., Рыбакова А.М. Микробиоло-гия.- М.: Медицина, 1998.- 336с.

3. Медицинская микробиология /Под редакцией В.П. Покровского.– М.: ГЕОТАР-МЕД, 2001.– 768с.

4. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммуноло-гия и вирусология /Учебник для медицинских ВУЗов, С-Пб.: «Специальная литература», 1998.- 592с.

5. Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Микробиология /Учебник.- 2-е изд., перераб. и доп.– М.: Медицина, 1983.- 512с.

6. Конспект лекции.

Дополнительная литература:

1. Титов М.В. Инфекционные болезни.- К., 1995.– 321с.

2. Шувалова Е.П. Инфекционные болезни.– М.: Медицина, 1990.- 559с.

3. БМЭ, Т. 1,2,7.

Краткие методические указания для работы на практическом занятии.

В начале занятия проводится проверка уровня подготовки студентов к занятию.

Самостоятельная работа состоит из изучения методов микробиологической диагностики менингококковой инфекции. Студенты изучают схему выделения чистой культуры менингококка и микроскопируют готовые зафиксированные мазки из чистой культуры менингококка.

Дальше студенты изучают схему выделения чистой культуры гонококка, знакомятся с правилами забора материала от больных гонореей для проведения прямой микроскопии исследуемого материала и микроскопируют готовые зафиксированные мазки гноя из уретры больных.

Потом студенты зарисовывают микропрепараты и дают необходимые пояснения.

В состав самостоятельной работы входит также микроскопия демонстрационных препаратов и их зарисовывание.

В конце занятия проводится оформление протокола, тестовый контроль и анализ результатов самостоятельной работы каждого студента.

Технологическая карта проведения практического занятия

Целевые учебные задания:

1. При бактериоскопическом исследовании слизи с задней стенки носоглотки выделены грамотрицательные кокки, напоминающие кофейные зерна и расположенные парами или тетрадами. Назовите возбудитель, который был изолирован бактериологом?

A. Acinetobacter calcoaceticum.

В. Staphylococcus aureus.

С. Neisseria gonorrhoeae.

D . Moraxella lacunata.

Е. Neisseria meningitidis.

1. При исследовании гнойных выделений с шейки матки выявлено в них грамнегативные диплококки, расположенные как в лейкоцитах, так и вне них. Назовите возбудителя гнойного воспаления шейки матки в этом случае.

А . Chlamidia trachomatis.

В . Neisseria gonorroeae.

С . Trichomonas vaginalis.

D. Haemophilus vaginalis.

Е. Toxoplasma gondii.

1. При бактериологическом исследовании материала от больного с подозрением на хроническую гонорею, роста микроорганизмов на специальных питательных средах не обнаружено. Какие методы диагностики следует применить, чтобы подтвердить или опровергнуть диагноз хронической гонореи?

Поставить РСК, аллергическую пробу с гонококковым аллергеном.

Определить титр антител в сыворотке крови больного, используя РПГА

Биологический метод

Иммунную электронную микроскопию

Повторить посев исследуемого материала на дифференциально-диагностические среды

1. Из гноя, взятого из уретры больного с подозрением на острую гонорею, приготовлен мазок и окрашен по Граму. При микроскопии его обнаружено большое количество кокков. Какие тинкториальные свойства увиденны х микроорганизмов и характер их расположения в препарате будут свидетельствовать в пользу предполагаемого диагноза?

А. Грамположительные кокки, расположенные внутри и вне лейкоцитов

В. Грамотрицательные диплококки, расположенные внутри и вне лейкоцитов

С. Грамположительные тетракокки, расположенные вне лейкоцитов

D . Грамотрицательные тетракокки

Е. Грамположительные кокки, расположенные в виде цепочек

1. На специальной питательной среде после посева гнойного выделения из уретры появились нежные голубые колонии. При микроскопии препаратов в них выявлены грамотрицательные бобовидные диплококки. Возбудителем какой болезни они являются?

А. Уреаплазмоза

В. Сифилиса

С. Хламидиоза

D . Гарднерелеза

Е. Гонореи

1. При посеве осадка спинномозговой жидкости, полученной у ребенка с диагнозом «эпидемический цереброспинальный менингит» на специальной среде выросли нежные колонии с голубоватым оттенком. Микроорганизмы, которые их образовали, были идентифицированы как нейссерии. Какой тест необходимо использовать для определения патогенности выделенных у этого больного нейссерий?

А. Реакция гемолиза

В. Лецитовителазная активность

С. Реакция плазмокоагуляции

D . Оксидазная реакция

Е. Реакция ферментации манита в анаэробных условиях

1. От больного ребенка цереброспинальным менингитом получили спинномозговую жидкость мутного характера, содержащую большое количество лейкоцитов. Какую из серологических реакций следует провести для экспресс-диагностики заболевания?

A . Реакцию преципитации

B . Реакцию агглютинации

C . Реакцию связывания комплемента

D . Р еакцию гемагглютинации

E . Реакцию нейтрализации

1. У больного ребенка с явлениями гнойного кератоконъюнктивита врач-офтальмолог заподозрил бленнорею (гонорейный конъюнктивит). Какими методами лабораторной диагностики следует воспользоваться для подтверждения диагноза?

A . Микроскопическим и бактериологическим

B . Серологическим и аллергическим

C . Биологическим и методом фагодиагностики

D . Биологическим и аллергическим

E . Микроскопическим и серологическим

1. Больному ребенку врач поставил диагноз «менингококковый назофарингит». Какой метод лабораторной диагностики наиболее рациональный для подтверждения диагноза?

A . Бактериологический

B . Биологический

C . Серологический

D . Микроскопический

E . Аллергический

1. У больного С., который лечится в кожно-венерологическом диспансере по поводу хронической гонореи, диагностировали острую гонорею. Какой вид инфекции развился у больного в этом случае?

A . Реинфекция

B . Суперинфекция

C . Вторичная инфекция

D . Персистирующая инфекция

E . И напарантная инфекция

1. В детском саду провели обследование детей и персонала в целях выявления менингококкового носительства. Подберите метод микробиологического исследования.

A . Бактериологический

B . Аллергический

C . Бактериоскопический

D . Биологический

E . Серологический

1. При бактериоскопии осадка спинномозговой жидкости больного с подозрением на менингит были выявлены грамотрицательные диплококки. Для подтверждения диагноза осадок спинномозговой жидкости посеяли на питательную среду. Какая среда из перечисленных была использована?

A . Сывороточный агар

B . МПА с линкомицином

C . Кровяной агар с пенициллином

D . Кровяной агар с линкомицином

E . МПА с ристомицином

Алгоритм лабораторной работы:

1. Проверка уровня подготовки студентов к занятию: решение исходных тестов.

2. Изучение методов микробиологической диагностики менингококковой инфекции – схемы выделения чистой культуры менингококка.

3. Микроскопия готовых зафиксированных мазков из чистой культуры менингококка.

4. Изучение схемы выделения чистой культуры гонококка.

5. Ознакомление с правилами забора материала от больных гонореей для проведения прямой микроскопии исследуемого материала.

6. Микроскопия готовых зафиксированных мазков гноя из уретры больного.

7. Зарисовывание микропрепаратов в протокол.

8. Анализ результатов самостоятельной работы каждого студента.

9. Оформление протокола.

Семейство Neisseriaceae

Клетки сферические, образующие пары или скопления (где прилегающие друг к другу стороны клеток уплощены), или палочковидные, в парах и коротких цепочках. Жгутиков не имеют, но некоторые способны к кувыркающимся движениям. Грамотрицательны. У некоторых видов образуется ксантофиловый пигмент. Некоторые виды обладают сложными пищевыми потребностями. У большинства видов образуется каталаза и хромоксидаза. Аэробы. Оптимальная температура 32-37°С.

Род Neisseria

Кокки (0,6-1,0 мкм), встречаются поодиночке, а часто и в парах, в которых соприкасающиеся стороны клеток уплощены. Делятся в двух взаимоперпендикулярных плоскостях, что приводит к образованию тетрад. Грамотрицательны, спор не образуют, неподвижны. Могут иметь капсулы и фимбрии. Два вида образуют желто-зеленоватый пигмент. Сложные потребности для роста. Некоторые виды - гемолитические. Хемоорганотрофы. Аэробы или факультативные анаэробы. Отдельные виды сбраживают глюкозу с образованием кислоты без газа. Каталазо- и оксидазоположительные. Восстанавливают нитриты.

Род Branhamella

Род Moraxella

Палочки, очень короткие и толстые (1,0-1,5*1,5-2,5 мкм), часто приближающиеся к кокковой форме, преимущественно в парах или коротких цепочках. Некоторые культуры очень однородны, другие - полиморфны. Полиморфизм усиливается в анаэробных условиях. Грамотрицательные, спор не образуют, жгутиков не имеют, но в особых условиях проявляют «дергающееся» движение на твердых поверхностях. Строгие аэробы. Оксидазо- и каталазоположительные. Углеводы не используют. Индол, ацетон, сероводород не образуют. Оптимальная температура 32-35°С, оптимум рН 7,0-7,5. Большинство штаммов более или менее привередливы, но специфические потребности роста неизвестны. Крайне чувствительны к пенициллину.

Род Acinetobacter (Achromobacter)

Палочки, обычно очень короткие и толстые (1,0-1,5*1,5-2,5 мкм), приближающиеся к кокковидной форме в стационарной фазе роста, преимущественно в парах и коротких цепочках. Спор не образуют, некоторые штаммы способны к «дергающемуся» движению на плотной питательной среде. Грамотрицательные. Строгие аэробы. Оксидазоотрицательные, каталазоположительные. Индол, сероводород и ацетон не образуют. Желатин не разжижают, используют DL-лактат. Оптимальная температура 30-32°С, рН около 7,0. Устойчивы к пенициллину.

Свободнодвижущиеся, повсеместно распространенные сапрофиты.

Род Paracoccus

Клетки сферические или почти сферические (0,5-1,1 мкм в диаметре), встречаются поодиночке, в парах или агрегатах. В молодых культурах могут встречаться короткие палочковидные клетки. Грамотрицательные, неподвижные, спор не образуют. Аэробы, но некоторые способны к нитратному дыханию, восстанавливая при этом нитраты до закиси азота и N 2 . Оксидазо- и каталазоположительные. Хемоорганотрофы.

Встречаются в почве.

Род Lampropedia

Клетки округлые или почти кубические (когда упакованы вместе), 1,0-1,5*1,0-2,5 мкм, образуют пары, тетрады или правильные квадратные пластинки. Грамотрицательны, неподвижны, в быстро растущих культурах наблюдается «дрожание» клеток. Спор не образуют. Во время роста образуют тонкую, сухую, морщинистую пленку на поверхности плотных и жидких питательных сред. Не пигментированы. Облигатные аэробы. Углеводы, спирты, жирные кислоты не используют. Растут при температуре 10-35°С и рН 6,0-8,5. Оксидазо- и каталазоположительные.

Обитают в местах, богатых органическими веществами. Источниками энергии служат интермедиаты циклотрикарбоновых кислот.

Лабораторная диагностика пневмококков.

Токсины и ферменты патогенности.

Ферментативные свойства

Пневмококки ферментируют глюкозу, лактозу, сахарозу и инулин образо-ванием кислоты без газа. Ферментация инулина и лизис пневмококков в желчи и желчных солях является важным признаком при дифференциации их со стрептококками.

В организме человека пневмококки не образуют экзотоксин. Содержат эндо-токсин, обладающий ядовитыми свойствами. Специфические капсульные по-лисахариды пневмококков подавляют фагоцитарную активность клеток рети-кулоэндотелиальной системы.

Некоторые штаммы продуцируют и ферменты патогенности:

§ фибринолизин- растворение сгустков фибрина

§ лейкоцидин- разрушение лейкоцитов

§ гиалуронидаза- гидролизирует гиалуроновую кислоту и повышает проницаемость соединительной ткани, способствует распростра-

нию стрептококков в глубь соединительной ткани

Резистентность. Пневмококки мало устойчивы вне организма человека, в мокроте сохраняются до 2 месяцев и погибают:

Ø при 56 0 в течение 10 минут

Ø 3%-ный раствор карболовой кислоты убивают пневмококки в течение 1-2 минут.

Патогенность для человека и животных. Пневмококки вызывают-воспаление легких у телят, поросят, ягнят. Патогенные штаммы пневмококков вызывают крупозную (долевую) пневмонию, септицемию, воспаление среднего уха, мозговых оболочек, воспаление слезного мешка, поражение суставов, эндо-кардит, ангины. Острые катары верхних дыхательных путей.

Исследуемый материал от больных: содержимое гнойных очагов, налеты с миндалины, слизь из зева, кровь, мокрота, моча;

Для лабораторной диагностики применяют: микроскопический, бактериологи-ческий и серологические методы исследования.

Микроскопический метод . В мазках из гноя, слизи, мокроты, окрашенных по Грамму, стрептококки располагаются короткими цепочками попарно, имеют ланцетовидную форму.

Бактериологический методы исследования. Посев крови от больных делают на сахарный бульон, где образуется муть и осадок. Хорошо растут на бульоне с добавлением 0,2% глюкозы.

Гной, слизь из зева, мокроту, осадок мочи делают посев на чашки Петри с 5% -ным кровяным агаром. Чашки с посевами помещают в термостат t 0 =37 0 на 18-24 часа. При положительной реакций образуются колоний мелкие, округлые, сочные с a-гемолизом (зеленая зона).

Серологические метод . Пневмококковые антигены в крови больного выявляют в реакции связывания комплемента (РСК).

Лечение. Назначают больным пенициллин, эритромицин и сульфаниламидные препараты. При хронических пневмококковых инфекциях применяют антимикробные иммунные сыворотки.

Специфическая профилактика пневмококковых заболеваний не разработана.