Что означает положительный результат анализа на сифилис. Ошибочные результаты анализов на сифилис

Ложноположительные серологические реакции на сифилис (ЛПР) – это положительные реакции у людей, которые никогда не болели и в момент обследования не болеют сифилисом. То есть специфической инфекции в организме нет и не было, а серологические реакции дают положительный результат.

Ложноположительными, или неспецифическими результатами называют положительные результаты серологических реакций на сифилис у лиц, не страдающих сифилитической инфекцией, и не болевших сифилисом в прошлом.

Ошибочный анализ на сифилис из-за технических причин

ЛПР могут быть обусловлены техническими погрешностями и ошибками при выполнении исследований, а также качеством реагентов. Несмотря на многочисленные достоинства диагностикумов для РПГА, ИФА и РИФ и их модификаций, применяемых для диагностики сифилиса, в отдельных случаях отмечаются недостоверные результаты анализов. Это может быть связано как с недостаточным уровнем квалификации и профессиональной ответственности персонала (так называемые небиологические или технические ошибки), так и с особенностями тестируемых образцов (биологические ошибки).

Ошибки небиологического характера могут возникать на любом этапе проведения исследований: преданалитическом, аналитическом, и постаналитическом т.е. при заборе, транспортировке, хранении биоматериала, использовании хилезной, проросшей сыворотки, при неоднократном замораживании и оттаивании тестируемых образцов, а также при использование диагностикумов с истекшим сроком годности и т.д. В частности, несоблюдение условий и сроков хранения диагностических наборов является причиной снижения чувствительности реакции и получения ложноотрицательных результатов.

Ложноположительные результаты может вызвать контаминация сывороток пациентов, серонегативных в отношении бледной трепонемы, следами сывороток серопозитивных лиц, что может иметь место при приготовлении сывороток.

Существует множество других технических ошибок, приводящих к получению недостоверных (ложноотрицательных и ложноположительных), сомнительных результатов исследования. В некоторых лабораториях не осуществляется внутри- и внешнелабораторный контроль качества исследований на сифилис, что ведет к получению диагностических ошибок и неуверенности врачей-лаборантов в результатах анализа.

Источником ошибок при постановке неспецифических тестов могут быть неиспользование контрольных сывороток, неравномерная концентрация антигена в опыте из-за недостаточного перемешивания ее перед использованием, контаминация образцов и посуды микроорганизмами, нарушение сроков и условий хранения компонентов реакции, нарушение техники взятия крови.

В современных тест-системах в качестве антигена нашли применение рекомбинантные или синтетические пептиды. Первые получили большее распространение. Но при плохой очистке в смесь антигенов T. pallidum попадают белки Escherichia coli, что приводит к ложной серодиагностике сифилиса у больных эшерихиозом или здоровых, в сыворотке которых обнаружены антитела к кишечной палочке.

В определенной степени к диагностическим ошибкам следует отнести и неправильную трактовку результатов исследования.

Острые и хронические ЛПР

Помимо технических ошибок при выполнении тестов, ЛПР могут быть обусловлены и особенностями организма. Условно ЛПР разделяют на острые (<6 месяцев) и хронические (сохраняются более 6 месяцев).

Острые ЛПР могут наблюдаться при беременности и во время менструации, после вакцинации, после недавно перенесенного инфаркта миокарда, при многих инфекционных заболеваниях. Инфекции, при которых могут отмечаться ЛПР - пневмококковая пневмония, скарлатина, инфекционный эндокардит, туберкулез, лепра, венерическая лимфогранулема, шанкроид (мягкий шанкр), лептоспироз и другие спирохетозы, ВИЧ-инфекция, инфекционный мононуклеоз, малярия, ветряная оспа, вирусные гепатиты, паротит, корь, респираторные заболевания, грипп и дерматозы.

Острые ЛПР нестойки, их спонтанная негативация происходит в течение 4-6 месяцев.

Хронические ЛПР возможны при аутоиммунных заболеваниях, системных болезнях соединительной ткани, онкологических заболеваниях, хронической патологии печени и желчевыводящих путей, при сердечно-сосудистой и эндокринной патологии, при заболеваниях крови, при хронических заболеваниях легких, при инъекционном применении наркотиков и др. При большинстве этих состояний выявляют антикардиолипиновые антитела классов IgG и IgM ("реагины").

Хронические ложноположительные реакции могут оставаться позитивными в течение всей жизни.

Хронические ложноположительные реакции могут являться преклиническими проявлениями тяжелых заболеваний. При злокачественных новообразованиях, диффузных болезнях соединительной ткани титр ЛПР может быть очень высоким.

Среди причин хронических положительных реакций выделяют физиологические состояния (пожилой возраст). С возрастом количество ЛПР увеличивается, у женщин они наблюдаются в 4,5 раза чаще, чем у мужчин. В возрастной группе 80-летних лиц распространенность ЛПР составляет 10%.

Причиной ЛПР могут быть частое использование вводимых внутривенно препаратов, частые переливания и инфузии.

Хронические инфекции (туберкулез, лепра, инфекционный эндокардит, малярия), миелома также могут стать причинами ЛПР.

Заражение другими видами спирохет

Ложноположительные реакции трепонемных и нетрепонемных тестов могут наблюдаться при инфекционных заболеваниях, возбудители которых имеют антигенное сходство с бледной трепонемой. Это возвратный тиф, лептоспироз, клещевой боррелиоз, тропические трепонематозы (фрамбезия, беджель, пинта), а также воспалительные процессы, обусловленные сапрофитными трепонемами полости рта и гениталий.

Возбудители эндемических трепонематозов (фрамбезия, пинта, беджель) - это трепонемы, которые обладают родоспецифическими антигенами, сходными с антигенами T.pallidum. В связи с этим антитела, образующиеся к ним, способны вступать в перекрестные взаимодействия с антигеном возбудителя сифилиса.

Россия не является территорией, эндемичной по данной группе заболеваний. Эти инфекции встречаются главным образом, в странах Африки, Латинской Америки и Южной Азии, и случаи заболеваний редки в практике лечебных учреждений.

Пациента с положительными серологическими реакциями на сифилис, прибывшего из страны с эндемическими трепонематозами, необходимо обследовать на сифилис и назначить противосифилитическое лечение, если оно ранее не проводилось.

Биологическая ложноположительная реакция Вассермана

Начиная с 1938 года, и особенно во время Второй Мировой войны, в США стали широко проводиться скрининговые серологические исследования для выявления сифилиса. Исследователи сопоставили полученные данные и выяснили, что положительная или сомнительная реакция обнаруживалась у людей не имевших клинических и эпидемиологических признаков сифилитической инфекции или контактов по сифилису. Причем такие результаты возникали гораздо чаще, чем предполагалось ранее. Положительные результаты нетрепонемных тестов с липидными или кардиолипиновыми антигенами (VDRL, в тестах Колмера, реакции Кана) были обнаружены у пациентов с различными заболеваниями, но не имеющих признаков сифилитической инфекции. Биологические ложнополжительные результаты были выявлены у пациентов с аутоиммунными, воспалительными и гематологическими заболеваниями.

В русскоязычной медицинской литературе этот феномен получил наименование «биологическая ложноположительная реакция Вассермана » (Б-ЛПРВ), т.к. указанные результаты наблюдались при проведении самого распространенного теста тех времен - реакции Вассермана.

Оказалось, что Б-ЛПРВ может встречаться в двух основных вариантах - остром и хроническом. В первом случае у больных, перенесших какую-либо, но не сифилитическую инфекцию, Б-ЛПРВ исчезает в процессе выздоровления, и длительность ее обнаружения не превышает шести месяцев. Во втором случае Б-ЛПРВ может устойчиво сохраняться в течение многих лет в отсутствие очевидного причинного фактора. В начале 50-х годов было установлено, что наиболее часто хроническая Б-ЛПРВ выявляется при аутоиммунных заболеваниях, особенно СКВ, при которой частота ее обнаружения достигает 30-44%

Ложноположительность нетрепонемных (кардиолипиновых) тестов

Липидные антигены T. pallidum cоставляют значительную часть клетки, однако в организме могут присутствовать и имеющие такое же строение липиды – аутоантигены, образующиеся в результате разрушения органов и тканей (в основном липиды митохондриальных мембран).

Сифилитическая инфекция сопровождается образованием иммунных комплексов и аутоиммунным ответом на кардиолипин, фибронектин, коллаген и мышечную креатинкиназу. В нетрепонемных тестах в качестве антигена используют раствор трех высокоочищенных липидов (кардиолипин, стабилизированный лецитином и холестерином) в этиловом спирте. Кардиолипин не является специфичным компонентом для T. pallidum, а также описан как один из фосфолипидов биомембран человека. Поэтому антитела к этому антигену регистрируют в сыворотке практически при любой альтерации клеток человека в результате инфекций и при некоторых физиологических и патологических состояниях.

Так как антиген, используемый в нетрепонемных реакциях, обнаруживается в других тканях, тесты могут давать положительные результаты у лиц без трепонемной инфекции (1-2 % в общей популяции).

Наиболее частой причиной биологических ложноположительных нетрепонемных тестов является антифосфолипидный синдром - аутоиммунный процесс, встречающийся при заболеваниях соединительной ткани (системной красной волчанке, дерматомиозите, склеродермии).

При использовании нетрепонемных тестов (РМП и ее модификаций) ложноположительные результаты могут быть обусловлены наличием в крови антител к ревматоидному фактору, перекрестно реагирующих антител при аутоиммунной патологии («кресс-реактеры»).

Другими факторами возникновения ложноположительных результатов считаются некоторые хронические бактериальные инфекции (лепра и др.), заболевания вирусной этиологии (инфекционный мононуклеоз), системные болезни соединительной ткани.

Причины также могут заключаться в пожилом возрасте (старше 70 лет), беременности, обширной соматической патологии, нарушениях обмена липидов, иммунодефицитных состояниях различной этиологии, системными хроническими заболеваниями сердца, легких.

Среди других причин следует отметить онкологические заболевания, туберкулез, энтеровирусные инфекции, вирусные гепатиты, болезнь Лайма, пневмонии, алкоголизм, наркоманию, сахарный диабет, вакцинацию, другие инфекции (малярия, ветряная оспа, корь, эндо- и миокардиты), подагру.

При этих состояниях отмечается развитие иммунологических нарушений, приводящих к аномальной продукции антител, способных перекрестно реагировать и с трепонемными антигенами.

Таблица. Биологические причины ложноположительных реакций при нетрепонемных серологических тестах.

Ложноположительность трепонемных тестов

Проблема усугубляется тем, что трепонемные тесты также могут быть ложноположительными. Причинами могут являться аутоиммунные заболевания, коллагенозы, болезнь Лайма, беременность, лепра, герпес, малярия, инфекционный мононуклеоз, опухоли, наркомания. В последние годы для дифференциации ЛПР за рубежом начали активно использовать иммуноблоттинг - один из самых современных методов диагностики сифилиса.

Сохранение антител после успешного лечения

Специфические диагностические реакции длительное время остаются положительными даже после полноценной терапии. После эффективного лечения сифилитической инфекции, у большинства больных титры в нетрепонемных тестах снижаются в 4 раза через 6–12 месяцев после лечения. Однако, при позднем начале терапии, титры даже в нетрепонемных тестах могут сохраняться на прежнем уровне, но никогда не увеличиваться.

Ложноотрицательные результаты анализов

Различные методы диагностики демонстрируют различную чувствительность и специфичность в зависимости от формы и стадии сифилиса. Вероятность ошибочного диагноза возрастает, особенно в случаях латентного, скрытого, сочетанного течения заболевания.

Ложноотрицательные серологические реакции на сифилис могут наблюдаться при вторичном сифилисе вследствие феномена прозоны при тестировании неразведенной сыворотки, а также при обследовании лиц с иммунодефицитным состоянием, например ВИЧ-инфицированных пациентов.

Ложноотрицательные результаты серологических специфичес- ких реакций (РПГА), вызванные биологическими факторами, могут быть обусловлены конкуренцией между специфическими IgM и IgG за связывание с антигеном на поверхности эритроцитов, а также «феноменом прозоны». В последнем случае агглютинация не происходит из-за гиперпродукции антител к бледной трепонеме, поскольку каждый антиген-рецептор на эритроцитах из-за избытка антител связан с одной молекулой агглютинина, что препятствует образованию «решетки». Замена РПГА на TPPA, т.е. эритроцитов на синтетические частицы, видимо, исключит или минимизирует получении ложноотрицательных результатов.

В ИФА такие реакции можно объяснить наличием серонегативной фазы при первичном сифилисе, а при вторичном - иммунной недостаточностью, наличием ВИЧ-инфекции. При получении отрицательного результата серологических исследований на сифилис следует учитывать свойство бледных трепонем проникать и размножаться в различных органах и тканях - поиск возбудителя в лимфе (лимфатических узлах) в ряде случаев приводит к достоверному результату. Целесообразно повторить также анализ образцов, давших положительный результат. Повторное, через 5–7 и более дней, исследование сывороток, как правило, позволяет получить достоверные результаты.

При прохождении обязательных медицинских обследований проводится RW-анализ крови - что это, расскажет врач. Аббревиатура расшифровывается как реакция Вассермана. Это исследование является методом диагностики сифилиса, помогает выявить наличие даже скрытой формы болезни. Сдавать такой анализ следует натощак и соблюдая определенные правила.

Что такое RW-анализ крови

В особую категорию медицинских исследований входит кровь на RW, или реакция Вассермана. Данная методика выявляет в крови маркеры сифилиса и определяет, сколько времени прошло с момента заражения (после контакта с носителем инфекции). Сегодня сдача крови на RW является единственным способом диагностики латентной формы заболевания. Достоверность анализа влияет на программу терапии, от результата которой зависит качество жизни пациента.

Сифилис является хроническим венерическим заболеванием, которое вызывает возбудитель бледных трепонем. Характеризуется проявлением язв на коже, слизистых оболочках. При своевременной диагностике сифилис успешно лечится иммуномодулирующими препаратами. Анализ на RW определяет возбудителя сифилиса и специфические антитела к нему, вырабатываемые иммунной системой человека.

Показания к анализу

Сдавать кровь на РВ в обязательном порядке должны медицинские работники, сотрудники кабинетов косметологии и дерматологии, работники пищевой сферы. Другими показаниями к проведению специфического теста являются:

• планирование беременности;
• подготовка к операциям;
• незащищенный секс (особенно с новым партнером);
• подозрение на половые инфекции;
• донорство крови или спермы;
• появление непонятной сыпи на слизистых и коже, выделений из гениталий, сбой менструального цикла у женщин;
• видимое (особенно в паховой области).

Подготовка

Перед анализом запрещены к употреблению любые лекарственные препараты. Кофе, чай, алкоголь и соки нельзя пить минимум за 12 часов, разрешается только вода. Если необходим прием жизненно важного препарата, предупредите лаборанта. Антибиотики следует отменить за неделю до проведения теста. За день до исследования лучше исключить жирные, копченые, маринованные, мучные и острые продукты.

Как сдавать анализ крови на RW

Анализ крови на РВ сдают натощак – между приемом пищи и лабораторным тестом должно пройти минимум шесть часов. Анализы у взрослого человека берутся из локтевой вены, у младенца – из черепной или яремной вены. Пациента усаживают на стул или укладывают на кушетку, прокалывают вену и забирают 8-10 мл крови, отправляя ее на исследование. После забора материала рекомендуется правильное питание, большое количество жидкости (лучше предпочесть горячий сладкий чай). В этот день лучше отказаться от физических нагрузок и алкоголя.

Сколько готовится

Существует несколько методов анализа. От того, какой выбран, зависит время готовности результатов. Полимеразная цепная реакция является самым точным, новым и дорогим способом исследования. Результат после нее готов уже через пять часов, а достоверность составляет почти 100%. Серологическая проба готовится 1-4 дня, при сдаче крови в районных поликлиниках анализы готовы через 1-2 недели.

Расшифровка

В бланке результатов ставятся плюсы или минусы. Последние говорят об отрицательной реакции и отсутствии болезни. Положительная реакция может быть описана знаками от одного до четырех плюсов. Расшифровка показывает стадию болезни:

• ++++ или +++ – положительная проба;
• ++ – слабоположительная;
• + – сомнительная, требует перепроверки.

Если анализ RW показал минус, это не исключает, что сифилис у человека на первой или третьей стадии. Плюс отрицательная реакция может говорить о разрушении эритроцитов крови. Вторичный период сифилиса не всегда показывает положительный результат. В первые 17 дней реакция может быть отрицательной, и только к шестой неделе может показать ++++, да и то только у 25% больных сифилисом. После этого достоверность приближается к 80%. Примерно 5% здоровых людей показывают ложноположительный результат.

Анализ на РВ положительный

Если полученный анализ на РВ положителен, это говорит о наличии в крови антител к бледным трепонемам – то есть прошло около 1,5 месяцев с момента заражения. Другими причинами появления ++++ в бланке результатов являются:

• проведение противосифилитических лечебных мероприятий – снижение острого процесса;
• беременность при отсутствии самой болезни – расшифровка анализа будет слабоположительной примерно у 1,5% женщин;
• первичный сифилис – 80% случаев на 6-8 неделе;
• вторичный сифилис в 100% случаев;
• клинический рецидив болезни;
• третичный период заболевания – в 75% случаев;
• ранний врожденный сифилис.

RW отрицательный

При получении отрицательного результата анализа можно говорить об отсутствии в организме инфекции и антител к сифилису, но это не всегда так. На ранних стадиях заболевания результаты будут отрицательными, потому что антитела просто не успеют выработаться. Плюс на сбой достоверности влияют некоторые болезни, индивидуальные особенности пациентов.

Ложноположительная реакция

У 5% пациентов наблюдается ложноположительная реакция – состояние, когда анализ показывает ++, но пациент не болен. Причинами ложноположительного проявления служат:

• туберкулез, системная красная , проказа, лептоспироз, рак, тиф, скарлатина, ВИЧ и ;
• болезнь бери-бери и сонная, гепатит;
• у беременных или только что родивших;
• во время менструации;
• после наркоза, употребления алкоголя, наркотиков, жирной пищи, кофе, сигарет, лекарств, введения некоторых сывороток или вакцинации;
• острые инфекции беременных.

Что делать при положительном результате RW

Если полученные данные показывают ++++ или ++, необходим и вторичный забор крови. Иногда используется ОРС (отборочная реакция на заболевание). Для этого на предметное стекло наносят сыворотку крови, добавляют кардиолипидный антиген. Если и повторный результат положительный, требуется посещение врача-венеролога для постановки точного диагноза.

Для профилактики врожденного сифилиса у детей беременные сдают кровь на RW все девять месяцев: этот анализ входит в число обязательных процедур для будущих мам. Если произойдет заражение беременной, необходимо комплексное лечение первые месяцы. При пренебрежении лечением последствия опасны и для матери, и для будущего ребенка.

Анализ на определение сифилиса человеку приходится сдавать едва ли не чаще всех: приём на работу, медкомиссии, профилактические осмотры, беременность. Выполнение этих исследований необходимо – они позволяют выявить заболевание на ранних стадиях, когда лечение будет иметь наиболее высокую эффективность.

Полученный положительный результат нередко ставит в тупик человека, особенно при отсутствии каких-либо поводов. Выявление сифилиса ложноположительного – достаточно частое явление, а потому не стоит раньше времени поддаваться панике. Согласно информации из разных источников, до 30% первичных исследований могут давать неправильный результат. Причин такому явлению достаточно много: изменение состояния организма, соматические заболевания. Чтобы лучше понять, почему появляются ложные данные, стоит более тщательно разобраться в вопросе проведения исследования.

Типы анализов на сифилис

Методы клинических исследований стремительно совершенствуются с каждым годом. С разработкой новых способов диагностики, ложноположительная реакция на сифилис встречается всё реже. При необходимости диагностика может включать в себя несколько разных методик – это позволяет получить наиболее достоверный результат.

Нетрепонемные методы исследования

Эти методики направлены на выявление белков, которые образуются в результате активности бледной спирохеты. Они направлены на определение «следов» возбудителя. Такие методы имеют относительно высокий процент погрешности (до 10%). Подобные методики являются неспецифичными, но позволяют по титру антител определять степень заражения.

Реакция Вассермана RW

Наиболее распространённым анализом, который проводится для выявления бледной трепонемы, является серологическое исследование крови. Реакция Вассермана позволяет всего за несколько минут определить наличие болезни. Поэтому данная методика применяется в лабораториях чаще всего – она не требует много времени и имеет относительно низкую стоимость.

Для выполнения анализа используется спинномозговая жидкость или кровь. Забор исследуемого материала может осуществляться из пальца (если анализ всего один) или из вены (если требуется проведение нескольких исследований). При проведении анализа может быть не только ложноположительный, но и ложноотрицательный результат. Он возможен при следующих обстоятельствах:

• ранняя стадия заражения, когда количество трепонем в организме ещё низкое;
• хроническое заболевание в стадии затихания, когда число антител снижается.

Обратите внимание! Ложноотрицательный результат возникает крайне редко, а потому при наличии хотя бы одного плюса из четырёх, необходимо пройти дополнительное обследование.

Микрореакция реципитации (МР)

Данная методика исследования основана на реакции антиген-антитело. Она требует небольшого количества материала для выполнения. Направлена на выявление антилипидных антител, которые вырабатываются в процессе разрушения клеток трепонемой. Для исследования используется как кровь пациента, так и спинномозговая жидкость.

Поскольку разрушение клеток может происходить не только при сифилисе, анализ используется в качестве отборочного, а не подтверждающего. Существует два аналога этой методики:

• Микроскопический тест (VDRL). Для выполнения анализа применяется инактивированная сыворотка крови. При подозрении на поражение нервной системы сифилисом, в качестве исследуемого материала используется спинномозговая жидкость.
• Макроскопический тест (RPR). Считается методом экспресс-диагностики. Применяется визуальный подсчёт плазменных реагинов.

Данная реакция при несоблюдении необходимой стерильности может показывать ложноположительный результат. Появление такого анализа также возможно при неспецифическом повреждении тканей, что влечёт за собой разрушение липидов. При наличии положительного результата рекомендуется обязательное проведение трепонемного теста для подтверждения.

Трепонемные методы исследования

Эта категория анализов даёт наиболее точные данные, и тут редко бывают ложноположительные результаты. Исследования направлены на выявление специфичных белков, которые выделяются организмом в ответ на заражение. Данные методики имеют более высокую стоимость, а потому применяются в качестве подтверждающих, а не отборочных.

Специфические антитела начинают вырабатываться организмом только через несколько недель после заражения трепонемой. Они могут сохраняться в течение продолжительного периода после излечения болезни. Поэтому специфичные тесты могут показывать положительные результаты в течение продолжительного времени после ремиссии.

Обратите внимание! При положительном RW-анализе и отрицательном трепонемном тесте проводится повторное исследование через несколько недель.

Иммуноферментный анализ (ИФА, EIA)

Основывается на оценке уровня иммуноглобулинов класса IgA, IgB и IgM. Первые два типа белков вырабатываются в организме уже с 2 недели инфицирования, а IgM – через месяц после заражения.

Читайте также по теме

Особенности анализа крови РПГА (реакция пассивной гемагглютинации) на сифилис

Интерпретация анализа осуществляется на основании соотношения наличия иммуноглобулинов:

• обнаружены только IgA – с момента инфицирования прошло не более 14 дней;
• обнаружены IgA и IgB – заражение произошло от 14 до 28 дней назад;
• обнаружены все три типа – сифилис в организме более 28 дней;
• обнаружен только IgM – поздний сифилис.

Наличие IgM может быть признаком уже вылеченного сифилиса – синтез иммуноглобулинов IgM может продолжаться ещё несколько месяцев после ремиссии.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ, FTA)

Используется для подтверждения заражения на самых ранних этапах. Для исследования проводится забор крови из пальца или вены. Результат похож на анализ RW, где указан минус, или от 1 до 4 плюсов. При наличии хотя бы одного плюса может назначаться дополнительное исследование.

Крайне редко встречаются ложноположительные результаты при выполнении РИФ – они могут быть у беременных, а также у пациентов с заболеваниями соединительных тканей.

Реакция пассивной агглютинации (РПГА, TPHA)

Титр антител позволяет определить наличие сифилиса и его стадию. Достоверные данные эта методика даёт уже с 28 дня после заражения. Для оценки используется кровь из пальца или вены. Повышение количества антител означает более позднюю стадию болезни.

Наиболее точные методики исследования

Анализы этой группы отличаются высокой чувствительностью, а потому погрешность в их результатах крайне низка. Их отличает более высокая стоимость, в сравнении с другими методами, и более сложная техника выполнения.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Анализ ПЦР считается одним из самых высокоточных. Он направлен на определение участков патогенной ДНК в организме человека. Метод требует наличия специализированного оборудования и реактивов, а потому используется в редких случаях.

Имуноблоттинг

Комбинированный метод исследования. Направлен на определение иммуноглобулинов в сыворотке крови пациента. При анализе проверяется наличие комплекса антител, по которым и устанавливается диагноз. В данной методике применяется электрофорез, с помощью которого разделяют иммунодетерминанты, и реакция ИФА, которая проявляет разделённые точки.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)

Высокоспецифичный анализ, который определяет реакцию сыворотки крови на бледную трепонему. Он широко применяется во всём мире, поскольку имеет высокую вероятность точного результата. Специальные антитела (иммуномобилизины) у больного сифилисом способны обездвиживать трепонему. В крови здорового человека таких антител нет. Именно на наличии/отсутствии данной способности и основана методика исследования.

РИБТ используется для выявления тех разновидностей сифилиса, при которых реакция Вассермана даёт отрицательные результаты – поражение нервной системы, внутренних органов, скрытой формы болезни. Ложноположительный результат в странах СНГ встречается крайне редко. Причиной его появления может быть саркоидоз, лепра.

Причины ложноположительных результатов

Реакция Вассермана может определять «острый» и «хронический» ложноположительный результат. Его выраженность зависит от характера изменений состояния человека. Показывать стадию обострения RW может в таких случаях:

• инфекционные заболевания в стадии обострения;
• травматические повреждения;
• инфаркт миокарда;
• введение любой вакцины за несколько дней до пробы;
• пищевое отравление.

Эти состояния характеризуются усиленной работой иммунной системы, что приводит к повышенной выработке антител. Они ошибочно распознаются в реакции, как антитела к трепонеме, а потому возникает положительный результат.

При наличии патологий хронического характера иммунная система вырабатывает большое количество неспецифических антител, которые могут вызвать реакцию. В RW такое состояние может показывать ложноположительный результат. Поэтому стоит предупредить врача о следующих заболеваниях:

• хронические патологии соединительных тканей;
• туберкулёз;
• хронические заболевания вирусной этиологии: ВИЧ, гепатиты В, С, D;
• хронические заболевания печени;
• аутоиммунные патологии.

Читайте также по теме

Какая существует профилактика заражения сифилисом?

С возрастом в организме пациента окислительно-восстановительные реакции замедляются. Старение тканей также может показывать ложноположительный результат, а потому для пациентов преклонного возраста назначаются более точные методики исследования.

Обратите внимание! При положительной реакции Вассермана проводится дополнительное исследование, которое позволяет получить более точную картину, например иммунноферментный анализ.

Повторная проверка

Повторный тест на сифилис проводится при сомнительных результатах скринингового исследования. Он назначается при наличии одного или двух крестов – такой анализ требует дополнительной проверки. Исследование может давать ложноположительные результаты в нескольких случаях:

• Ранняя стадия болезни. До появления твёрдого шанкра количество иммуноглобулинов в организме достаточно низкое.
• Поздняя стадия болезни. С момента заражения прошло более 2 лет, и титр антител постепенно начал снижаться.

Повторный анализ, который проводится через 2-3 недели, показывает точно, есть ли заболевание. При наличии положительного результата второй раз, используются дополнительные уточняющие методики.

Анализы при беременности

Одним из самых неожиданных может стать положительный результат теста на сифилис у беременных, особенно если женщина не меняла партнёра. Такая ситуация нередко приводит в ужас будущих мам, поскольку трепонема может негативно влиять на внутриутробное развитие малыша.

Скрининговое исследование при беременности проводится несколько раз:

• при становлении на учёт, в 12 недель;
• начало 3 триместра, в 30 недель;
• перед родами.

Это то количество исследований, которое считается минимальным. Ложноположительный анализ на сифилис может проявляться из-за перестройки организма, происходящей во время беременности. Когда женщина вынашивает ребёнка, её иммунная система вырабатывает большое количество антител – это эволюционное приспособление для защиты малыша в первый год жизни.

Во время беременности назначают дополнительный уточняющий анализ, который характеризуется большей точностью. Если контрольное исследование показывает наличие возбудителя в организме, обязательно проводится лечение. Влияние терапии на растущий организм существенно меньше возможного вреда от трепонемы.

Как подготовиться к анализам?

Одним из способов предупреждения неправильного результата является подготовка к сдаче анализов. Из-за неправильной подготовки возможно появление реакций, которые сопровождаются выработкой неспецифических антител, что и приводит к появлению неправильного результата.

• Анализ обязательно нужно сдавать натощак. Можно употреблять только чистую воду.
• За сутки до забора крови стоит полностью исключить алкоголь – он создаёт дополнительную нагрузку на печень, что может привести к появлению положительного результата.
• Рекомендуется накануне отказаться от употребления жирной и жареной пищи, острых блюд и большого количества специй.
• Минимум за 60 минут до анализа рекомендуется воздержаться от курения.
• Перед забором крови из вены нужно отдохнуть минут 10-15 в приёмном покое.
• Женщинам не рекомендуется сдавать кровь во время менструаций.
• Нельзя проводить анализ после рентгенологического исследования, физиотерапевтических процедур.
• Запрещено сдавать кровь на сифилис в период обострения инфекционных заболеваний.

Обратите внимание! Если пациент принимает какие-либо лекарства, он должен проконсультироваться с врачом перед проведением исследования, может потребоваться перерыв в несколько дней между приёмом препаратов и анализом.

Что делать при подтверждении сифилиса?

Не стоит беспокоиться при получении первичного скрининга с положительными результатами. Ложный сифилис легко определяется повторным исследованием. Если всё же диагноз был подтверждён, нужно принять меры:

• обследование полового партнёра у дерматовенеролога;
• обследование близких родственников;
• выполнение превентивного лечения для предупреждения заражения у близких;
• оформление больничного листа на период лечения – больничный лист не содержит информацию о диагнозе, гарантируя конфиденциальность;
• по окончании курса лечения выдаётся специальная справка – её нужно иметь при себе, чтобы избежать в дальнейшие несколько месяцев вопросов о ложноположительных результатах.

Положительный результат на сифилис не всегда бывает достоверным. Поэтому не стоит беспокоиться и рекомендуется подождать дополнительного исследования. Правильное лечение, которое было начато вовремя, гарантирует быстрое выздоровление с минимумом остаточных явлений.

Анализ крови rw - один из способов диагностики сифилиса, данный метод относится к скрининговым (ориентировочным) тестам, используемым при массовых обследованиях. Положительный или отрицательный результат анализа еще не гарантирует наличие или отсутствие в организме возбудителя. Для точной постановки диагноза пользуются трепонемными методами, которые позволяют определить заболевание на ранних стадиях и распознать ложноположительный результат.

Лица, для которых анализ является обязательным

Существует ряд граждан, для которых сдача (иногда периодическая) анализа крови на сифилис является обязательной. К ним относятся:

- пациенты, впервые обратившиеся за помощью в поликлинику;

Больные перед поступлением в больницу на лечение;

Люди с наркотической зависимостью;

Доноры, сдающие сперму, кровь, ткани или иные секреты организма;

Медработники, работники общепита и точек, занимающихся реализацией пищевых продуктов;

Люди, имевшие контакт с больными, зараженными сифилисом;

Больные с лихорадкой, не проходящей более месяца и иными подозрительными симптомами (увеличившиеся местные лимфоузлы и прочее).

Необходимость анализа крови у столь широкого круга лиц объясняется коварностью сифилиса - он может длительное время протекать бессимптомно. В таком случае больной не подозревает о заражении, ведя при этом привычный образ жизни, подвергая тем самым опасности окружающих. Поэтому главной задачей анализа на rw является как можно более раннее определение сифилиса.

Анализ крови на сифилис: реакция Вассермана

Реакция Вассермана - другое название анализа крови на rw, такой метод был самым первым способом определения сифилиса. Его главное достоинство - простота выполнения реакции, что позволяет применять ее в качестве способа первичной диагностики у больших групп лиц. Для анализа берется 10 мл венозной крови (ее забор осуществляется утром натощак).

Суть исследования состоит в обнаружении парных комплексов в сыворотке крови пациента. Такие комплексы адсорбируют вещества возбудителей, проникшие в организм больного. В крови здорового человека подобные комплексы отсутствуют. В крови здорового человека происходит разрушение эритроцитов, называемое гемолизом. Наличие такого явления считается отрицательной реакцией на заболевание. При отсутствии гемолиза специалисты оценивают степень реакции, зависящую от стадии заболевания (обозначается несколькими знаками «+», от 1 до 4). Первичный сифилис делят на две стадии:

- сероотрицательную. В таком случае отрицательная реакция Вассермана не является достоверным признаком отсутствия или наличия сифилиса, для постановки диагноза приходится применять более точные способы диагностики;

Сероположительную. Такая реакция, как уже упоминалось выше, имеет разную степень выраженности:

Результат 1+ и 2+ считают слабоположительным;

3+ является положительным;

4+ называют резко положительным.

Вообще положительный результат реакция Вассермана может выдать лишь по прошествии 6 или 7 недель. В этом отношении наблюдается следующая закономерность:

- первые 17 дней у больных реакция на пробу может оказаться отрицательной;

На 5-й неделе анализ оказывается положительным только у четверти заболевших;

С 7-й недели у большинства больных проба становится положительной.

Показания к назначению

Кроме групп лиц, обязательно подлежащих обследованию, анализ крови rw назначается в следующих случаях:

при планировании беременности;

Появлении болей в костях;

При случайном половом контакте;

При обильных выделениях из половых путей и появлении язв на гениталиях;

При появлении высыпаний на слизистых и коже, увеличении лимфоузлов;

Во время профилактического исследования и предоперационной подготовки.

Rw анализ крови: расшифровка

Результаты реакции Вассермана оцениваются следующим образом:

Положительный результат:

- возможен на первом году после излечения сифилиса;

Серопозитивный сифилис (любая форма, от первичной до третичной).

Отрицательный результат:

- отсутствие заболевания;

Возможен вариант наличия раннего первичного или поздней стадии третичного сифилиса.

Кроме того, не исключена вероятность ложноположительного результата, который может быть обусловлен следующими состояниями:

- пневмонией;

Туберкулезом;

Состоянием после вакцинации;

Онкологическими заболеваниями;

Беременностью;

Наркоманией и алкоголизмом;

Сахарным диабетом;

Вирусным гепатитом.

В нашем медцентре вы можете выполнить качественный анализ крови на сифилис, для этого в клинике имеется все необходимое: квалифицированный персонал, прекрасное диагностическое оборудование и лучшие лабораторные материалы. Точная и своевременная диагностика особенно важна в случае с сифилисом, ведь главное - определить начальную стадию болезни, это позволит максимально упростить курс лечения и сократить его продолжительность.

Анализ на сифилис необходимо проводить, если человек видит в этом нужду, особенно при беспорядочных половых связях. Многие пациенты врачей-венерологов стесняются говорить о своих заболеваниях и проблемах. Специалисты тоже не всегда рассказывают все подробности по причине нехватки времени. Из-за такого незнания лечение может запоздать. Для чего нужен анализ крови на сифилис и как он проводится?

Что такое сифилис

Сифилис - это заболевание, относящееся к венерологическим. Вызывается он специфической бактерией, которая носит название бледной трепонемы. Она имеет спиралевидную форму. У бактерии есть несколько антигенов, в диагностике используется обычно один - кардиолипиновый. Заселяет бактерия слизистые оболочки половых путей, влагалищный секрет, сперму. Поэтому заболевание передается в основном половым путём - при незащищённых контактах. Крайне редко может встречаться контактный путь передачи. Также болезнь переходит от матери к плоду через плаценту, но не всегда. Заболевание имеет несколько периодов течения.

Знание особенностей этих периодов необходимо для диагностики:

1. Инкубационный период длится около трёх недель - в это время никаких признаков болезни нет, а бактерия колонизирует слизистые оболочки.
2. Серонегативный период продолжается в течение месяца - бактерия начинает размножаться, но не показывают никаких изменений.
3. Появляться антитела к трепонеме начинают в следующем периоде - серопозитивном, продолжительность которого также составляет месяц.
4. Клинические признаки, видные при осмотре, появляются в течение двух предыдущих периодов и во вторичном периоде, который длится несколько лет.
5. Третичный период - самая запущенная форма заболевания, когда начинают появляться осложнения.

Таким образом, диагностировать сифилис с помощью анализа крови можно через два месяца после заражения.

Диагностика заболевания

Какие анализы обычно сдают на сифилис? Человек может сдать мазок в кабинете венеролога. При этом берется отделяемое уретры - у мужчин, или влагалища - у женщин. Самый точный анализ - это исследование крови. При этом может требоваться сыворотка или сама кровь.

Это наблюдается в тех случаях, когда есть заболевания, повреждающие клетки таким же образом, как и трепонема. К данным заболеваниям относятся аутоиммунные. Поэтому антифосфолипидный тест является лишь начальным анализом.

Какие результаты возможны при проведении этого теста:

• отрицательный результат говорит об отсутствии сифилиса или о том, что человек находится в раннем серонегативном периоде или в позднем третичном;
• положительный результат требует проведения дополнительного исследования;
• ложноположительный результат может наблюдаться при беременности, наличии аутоиммунных заболеваний , при других ЗППП, у пациентов с диабетом и туберкулезом, у алкоголиков и наркоманов, при онкологических заболеваниях.

Более показательны результаты трепонемного теста.

Собственно говоря, этот анализ не один – их несколько. Для выявления сифилиса кровь исследуют несколькими способами. Помимо крови в лабораторной диагностике этого заболевания используют и другой биологический материал, в котором содержится возбудитель, бледная спирохета (син. – бледная трепонема).

Это отделяемое из сифилидов (специфических изъязвлений и высыпаний на коже и слизистых), при нейросифилисе - спинномозговая жидкость (ликвор).

Все методы диагностики сифилиса можно разделить на прямые и непрямые. Прямые методы направлены на непосредственное обнаружение бледной трепонемы. Что касается непрямых, то они основаны на обнаружении антител к спирохете. Есть антитела, значит, есть и сама спирохета. Непрямые методы диагностики сифилиса – это не что иное, как серологические реакции, в которых в качестве исследуемого материала используется сыворотка крови.

Антитела обнаруживаются при их взаимодействии с антигенами. Для проведения серологических реакций используются препараты, содержащие заданный антиген. В зависимости от типа этого антигена серологические реакции могут быть трепонемными и нетрепонемными. В трепонемных реакциях участвует антиген, специфичный для бледной трепонемы.

К трепонемным реакциям относят:

• РСК – реакцию связывания комплемента с трепонемным антигеном
• РПГА – реакцию пассивной гемагглютинации
• ИФА – иммуноферментный анализ
• РИФ – реакцию иммунофлуоресценции
• РИБТ – реакцию иммобилизации бледных трепонем

К нетрепонемным серологическим реакциям относят реакцию связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном и реакцию микропреципитации или тест быстрых плазменных реагинов.

Используемый в этих реакциях кардиолипиновый антиген не является антигеном бледной спирохеты. Это экстракт из бычьего сердца , по своей структуре сходный с кардиолипин-фосфолипидныс антигеном клеточной мембраны спирохет.

Поэтому антитела, вырабатывающиеся при появлении возбудителя сифилиса, будут реагировать и на этот антиген.

Реакция Вассермана (RW)

Когда говорят об анализе на сифилис, то чаще всего подразумевают именно этот метод, реакцию Вассермана. Данная реакция была разработана для диагностики сифилиса немецким иммунологом Вассерманом более столетия назад, еще в самом начале прошлого века. Однако ее проводят и сегодня, правда, с существенными изменениями.

По сути своей RW в нынешнем варианте относится к РСК. Под комплементом в иммунологии подразумевают систему плазменных белков, которые формируют врожденный иммунитет. RW основана на реакции антигенов с антителами с участием комплемента. Антитела к бледной трепонеме присутствуют в сыворотке больного сифилисом. Если к такой сыворотке добавить антигены, то антитела вступят с ними в реакцию.

Для RW используют уже готовые наборы специфических и неспецифических антигенов. Специфические антигены выделены из культур бледной трепонемы, выращенных на питательных средах.

Неспецифические антигены представлены кардиолипином бычьего сердца. Таким образом, RW можно отнести и к трепонемным, и к нетрепонемным исследованиям.

Реакция специфических и неспецифических антигенов с антителами исследуемой сыворотки внешне не видна. Для ее индикации используют бараньи эритроциты.

В составе гемолитической сыворотки иммунизированного кролика их добавляют к исследуемому материалу. Что же получается в конечном итоге?

Если исследуемый здоров, то антитела к трепонеме в его сыворотке отсутствуют. При этом под действием комплемента бараньи эритроциты гемолизируются (разрушаются), и это отчетливо видно в пробирке, содержимое которой равномерно окрашено без осадка («лаковая кровь»).

Таким образом, гемолиз говорит об отсутствии антител. В этом случае реакция отрицательная.

У больных сифилисом все наоборот. У них весь комплемент связывается при образовании иммунных комплексов антигенов с антителами, и его на разрушение эритроцитов, попросту говоря, не хватает.

Поэтому отсутствие гемолиз свидетельствует о наличии антител к спирохетам, и, соответственно, о сифилисе. В этом случае реакция положительная, и ее обозначают знаком плюс.

Точнее, плюсов может быть несколько, ведь задержка гемолиза имеет различную степень выраженности:

• 1 плюс – реакция сомнительная
• 2 плюса – реакция слабоположительная
• 3 плюса – реакция положительная
• 4 плюса – реакция резкоположительная.

На медицинском сленге плюсы в данном случае именую крестами, и результат обозначают соответственно: +, ++, +++ или ++++.

Методика RW довольно проста, недорога, занимает немного времени, и не требует сложного лабораторного оборудования. Поэтому к данной реакции прибегают повсеместно, причем не только при наличии конкретных показаний (подозрение на сифилис, наличие характерных симптомов).

Ее проводят в качестве скринингового метода при плановых профосмотрах, беременным при постановке на учет, всем пациентам при госпитализации в стационар.

Между тем, методика не лишена . Во-первых, она не всегда дает положительный результат при имеющемся сифилисе. Ведь антитела формируются не сразу, а спустя некоторое время.

Этот промежуток времени, когда нет антител, именуют серонегативным периодом сифилиса, и длится он 5-8 нед. с момента заражения.

А серопозитивный период сифилиса начинается уже в конце первичного сифилиса . Вторичный сифилис практически всегда серопозитивен, а третичный осложненный сифилис может быть серонегативным. В данном случае это вовсе не говорит о том, что бледной трепонемы нет в организме. Просто иммунная система за долгие годы истощилась, и антитела перестали выделяться.

С другой стороны, в ряде случаев даже после успешного лечения сифилиса 1-2 креста в анализе могут сохраняться долгие годы, а иногда и пожизненно.

Таким образом, количество крестов в RW не зависит от активности бледных трепонем и тяжести течения сифилиса. Для этого используют другой показатель – титр антител. Это максимальная степень разведения сыворотки, при которой имеется резкоположительная реакция.

Еще один недостаток RW – ее низкая специфичность с частыми ложноположительными результатами, когда идет задержка гемолиза при отсутствии сифилиса.

Среди причин ложноположительных результатов – другие бактериальные и вирусные инфекции , системные коллагенозы, беременность, алкоголизм, наркомания, прием лекарств, погрешности в питании, и многое другое. Поэтому очень важно правильно подготовится к анализу.

За 7-10 дней до взятия крови прекращают прием антибиотиков. В течение последних суток нужно воздержаться от приема обильной, жирной пищи , алкоголя.

Кровь для анализа берется из вены натощак. Отрицательные результаты при отсутствии характерных клинических проявлений в виде твердого шанкра с большой степенью достоверности свидетельствуют об отсутствии сифилиса. При наличии хотя бы одного из крестов прибегают к другим методам диагностики.

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА)

Реакция пассивной гемагглютинации заключается в склеивании или агглютинации эритроцитов. На используемых в этой реакции эритроцитах фиксируют трепонемные антигены. Затем к этому материалу добавляют исследуемую сыворотку.

Если в ней содержатся антитела, то они вступают во взаимодействие с антигенами на эритроцитах, что приводит к их агглютинации. Таким образом, агглютинация свидетельствует о положительной РПГА и об имеющемся сифилисе, а отсутствие агглютинации и отрицательная РПГА о том, что обследуемый здоров. Здесь также имеется 4 степени положительного результата с различным титром антител.

Чувствительность РПГА более высокая в сравнении с RW. Однако и этот анализ отрицателен в самом начале заболевания, в течение первых 2-4 нед., а иногда и 6 нед. В дальнейшем, во вторичном и третичном периоде, РПГА всегда положительная, как и при латентном сифилисе.

Поэтому ее можно использовать для диагностики заболевания без четких клинических проявлений. Подобно другим трепонемным исследованиям РПГА остается положительной пожизненно, даже после полного излечения . Поэтому ее нельзя использовать для оценки адекватности лечения сифилиса.

Отрицательной она может стать лишь в тех случаях, когда лечебные мероприятия начали проводиться сразу же, как только пациент заболел сифилисом.

РПГА также дает ложноположительные результаты при некоторых заболеваниях и патологических состояниях . От истинных положительных результатов ложноположительные отличаются тем, что они очень быстро, спустя несколько недель или месяцев становятся отрицательными.

Причем происходит это спонтанно, даже без специфического лечения . РПГА также относится к скрининговым методам диагностики. При положительном результате проводят другие трепонемные анализы.

Иммуноферментный анализ ИФА

Иммуноферментный анализ также основан на реакции антиген-антитело. Трепонемные антигены фиксируют на поверхности какого-либо твердого материала.

Как правило, это полистирол, из которого изготовлены современные тест-системы, имеющие вид планшетов с лунками. В эти лунки добавляют исследуемую сыворотку. Если в этой сыворотке имеются антитела, то они образуют с антигенами тест-систем комплексы.

Желтое окрашивание исследуемого материала указывает на наличие антител. Чем больше этих антител, тем интенсивнее окрашивание.

Антитела относятся к иммуноглобулинам (Ig), и представлены несколькими разновидностями – IgА, IgМ, и IgG. Их количество неодинаково в различные периоды заболевания. Поэтому по преобладанию того или иного Ig можно судить о давности заболевания.

ИФА становится положительной уже с 3 нед., и может оставаться таковой до конца жизни. Однако здесь тоже нередки ложноположительные результаты, что является существенным недостатком.

Среди достоинств ИФА – доступность метода и возможность проводить большое количество исследований за относительно короткий срок.

Реакция иммунофлуоресценции (РИФ)

Реакция иммунофлуоресценции основана на световой индикации комплекса антиген-антитело. Имеющийся антиген смешивают с исследуемой сывороткой. Если в ней присутствуют антитела, то они образуют с антигенами иммунные комплексы.

После этого к диагностируемому материалу добавляют антивидовую кроличью сыворотку, содержащую флуоресцеин, вещество, светящееся в ультрафиолетовом свете. Свечение обнаруживается при осмотре в люминесцентный микроскоп.

В зависимости от интенсивности свечения, цвет которого варьирует от едва заметного до желто-зеленого, выделяют 4 степени положительной РИФ.

Достоинства этого метода – его специфичность и чувствительность. При имеющемся сифилисе РИФ дает положительный результат в самом начале заболевания, уже к концу 1 нед. инфицирования, еще до того как появился шанкр.

Ложноположительные результаты практически не выявляются. Среди недостатков данного метода – технические сложности и необходимость специального оборудования.

Поэтому к РИФ прибегают при положительных результатах других анализов, нуждающихся в уточнении.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)

Реакция иммобилизации бледных трепонем основана на феномене обездвиживания, иммобилизации возбудителя в присутствии исследуемой сыворотке. В сыворотке пациента, больного сифилисом имеются антитела-иммуноглобулины, которые называют иммобилизинами из-за их способности обездвиживать спирохеты.

Иммобилизины выделяются гораздо позже, чем другие антитела, и РИБТ дает положительный результат лишь спустя 3 мес. после инфицирования.

Метод надежен, высокочувствителен, и мог бы использоваться при ложноположительных результатах других исследований. Однако он сложен в техническом отношении, долго проводится, требует дорогостоящего оборудования и специально обученного персонала.

Поэтому РИБТ, разработанная еще в середине прошлого века, в настоящее время с в клинической практике не используется. Ее проводят лишь в научно-исследовательских целях.

Микрореакция преципитации МП

Микрореакция преципитации имеет еще одно название – тест быстрых плазменных реагинов. В ответ на поврежденные компоненты клеточных мембран тканей или на компоненты мембран самих трепонем иммунная система выделяет антитела, именуемые реагинами.

На обнаружении этих реагинов и основан данный метод диагностики. К заданному антигену, включающему в себя холестерин, кардиолипин и лецитин, добавляют частицы угля для индикации.

Затем антиген смешивают с исследуемой сывороткой. Если в ней содержатся реагины, происходит реакция флоккуляции с образованием хлопьевидного осадка, который из-за присутствия частиц угля имеет черный цвет.

Положительной результат МП может отмечаться не ранее чем спустя 4-5 нед. после инфицирования. Как и при других серологических реакциях, здесь может быть неодинаковая степень выраженности и различный титр реагиновых антител.

Прямые исследования

Убедительным доказательством сифилиса является выявление возбудителей инфекции под микроскопом. Таким способом находят патоген у 8 обследуемых из 10. Отрицательный результат у 2 оставшихся пациентов не говорит о том, что они не инфицированы.

Исследование делают на первичном и вторичном этапе (стадии) заболевания, для которых характерно появление высыпаний на коже и сифилом (изъязвлений) на эпителиальных тканях или слизистых оболочках. В отделяемом из очагов поражения находят патогены, вызывающие венерическое заболевание .

Точнее с определением трепонем справляется сложный тест, обозначающийся как РИФ – реакция иммунофлуоресценции. Образец для исследования предварительно обрабатывают флуоресцентными антителами. Соединения, способные светиться, склеиваются с бактериями. Рассматривая под микроскопом образцы, в случае заражения лаборант видит сверкающих возбудителей.

Тест используют для раннего диагностирования болезни. Чем дольше длится заболевание, тем ниже чувствительность исследовательских способов. Кроме того, она падает после обрабатывания высыпаний и язв антисептическими средствами и у пациентов, прошедших лечение. Изредка исследование дает ложноотрицательные и ложноположительные результаты.

RIT-анализ – высокоточный способ обнаружения сифилиса. При проведении теста результаты приходится ждать долго. До тех пор, пока у инфицированного кролика не проявятся признаки инфекции. Тест применяют очень редко, несмотря на то, что он сверхточен.

С помощью полимеразной цепной реакции на сифилис определяют генетические элементы патогенов. Единственный недостаток ПЦР – дороговизна.

Нетрепонемные тесты

Такие анализы крови помогают выявить антитела, появляющиеся в ответ на кардиолипин – соединение, относящееся к общему строению мембран патогенов.

Реакция Вассермана (РВ или RW)

Самым известным исследованием на сифилис считается реакция Вассермана. РВ входит в категорию реакций связывания комплемента (РСК). Новые методы РСК обладают существенными отличиями от традиционной RW. Но обозначаются они, как и раньше понятием «реакция Вассермана».

• ++++ – максимально позитивные (гемолиз задержался);
• +++ – положительные (гемолиз существенно запаздывает);
• ++ – слабо позитивные (гемолиз частично промедлил);
• + – сомнительные (гемолиз припозднился незначительно).

При отрицательной РВ гемолиз полностью осуществился во всех образцах. Но в некоторых случаях получают ложноположительные данные. Такое происходит, когда кардиолипин входит в состав клеток. Защитные механизмы не продуцируют маркеры к «родному» кардиолипину.

Однако изредка возникают исключительные ситуации. Положительную RW выявляют у незараженных людей. Такое возможно, если пациент перенес тяжелую болезнь , вызванную вирусами (пневмонию, малярию, туберкулез, патологии печени и крови). Положительной РВ бывает у беременных. Обусловлено это тем, что иммунитет чрезмерно ослаблен.

Если возникает подозрение, что результат анализа на сифилис ложноположительный, пациента обследуют дополнительно. Проблема в том, что эту инфекцию невозможно выявить по единственному клинико-лабораторному тесту. Часть исследований дает ложные показатели, которые бывают, как отрицательными, так и положительными.

Получить достоверные данные помогает развернутый анализ на сифилис. Благодаря ему устанавливают истинный диагноз: доказывают заражение или исключают его. Кроме этого, расширенный тест позволяет остановить развитие инфекции, исключить проведение ненужной терапии.

РСК и РМП

Проводя обследование на сифилис, традиционную реакцию Вассермана применяют крайне редко. Вместо нее используют метод РСК. Анализ дает положительный результат спустя 2 месяца после инфицирования. При вторичной форме заболевания он положителен почти в 100% случаев.

Способ микропреципитации (РМП) – исследование с механизмом аналогичным реакции Вассермана. Методика проста в исполнении. Она быстро проводится. Для исследования кровь на сифилис в этом случае сдают из пальца. Методика дает положительный результат через 30 дней с момента появления сифилом. Ошибки при исследовании не исключены. Ложноположительные данные получают на фоне: обострившихся инфекций, пневмонии, инфаркта, инсульта, интоксикации.

К ошибочным тестам приводит:

• туберкулез;
• болезнь Бенье́-Бека-Ша́умана;
• ревматоидные заболевания;
• диабет;
• цирроз;
• бруцеллез;
• лептоспироз;
• мононуклеоз.

Обнаружив сомнительный анализ на сифилис, делают трепонемные исследования. Они помогают уточнить диагноз.

RPR и тест с толуидиновым красным

Метод плазменных реагинов (RPR) – очередной аналог реакции Вассермана. Его применяют, когда необходимо:

• провести скрининг бессимптомных лиц;
• подтвердить сифилис;
• исследовать донорскую кровь.

Тест с толуидиновым красным, как и RPR, проводят, чтобы оценить динамику лекарственной терапии . Их показатели падают при отступлении болезни, и увеличиваются, когда патология рецидивирует.

Нетрепонемные анализы показывают насколько больной излечился. Получение отрицательных результатов на сифилис говорит о том, что болезнь отступила полностью. Первое обследование делают спустя 3 месяца после курсовой терапии.

Трепонемные исследования

Высоко результативные анализы проводят, используя трепонемные антигены. Их делают, когда:

• получен положительный результат при методе РМП;
• необходимо распознать ошибочные данные, возникающие при скрининговых тестах;
• подозревают развитие сифилиса;
• нужно диагностировать скрытно текущую инфекцию;
• надо провести ретроспективную диагностику.

Тесты РИФ и РИТ

У множества пролеченных больных трепонемные исследования проб дают положительные результаты долгое время . По ним нельзя судить о степени эффективности лечения. РИТ и РИФ – сверхчувствительные тесты. Благодаря им получают достоверные данные. Эти анализы трудоемки, они требуют приличных временных затрат, наличия прогрессивного оборудования. Их способны проводить квалифицированные медработники.

Выполняя РИФ анализ на сифилис, положительные данные получают спустя 2 месяца после инфицирования. Отрицательные параметры подтверждают, что обследуемый здоров. Положительные – позволяют предположить, что человек инфицирован.

РИТ проводят, когда реакция микропреципитации положительна. Такой анализ крови на сифилис помогает опровергнуть или удостоверить наличие инфекции. Тест сверхчувствителен, он точно указывает заражен пациент или здоров. Но исследование дает достоверные данные только через 3 месяца после проникновения трепонем в организм.

Метод иммуноблоттинга

К сверхточным тестам относят иммуноблоттинг. Такой анализ крови при сифилисе делают редко. Его применяют при обследовании новорожденных детей. Он не пригоден для экспресс-тестирования. Положительные результаты получают с опозданием. Их гораздо раньше дает метод микропреципитации.

ИФА и РПГА

К информативным сверхточным методам исследования относят тесты ИФА и РПГА. С их помощью проводят экспресс-диагностирование. Лаборанты делают огромное количество таких анализов. Благодаря им удается установить точный диагноз.

РПГА анализ на сифилис положителен через 30 дней после проникновения возбудителя в организм. С его помощью диагностируют первичную инфекцию , когда появляются язвы и сыпь.

Благодаря ему удается выявить запущенные, скрытно текущие, а также врожденные формы патологии. Но проводят его совместно с нетрепонемными и трепонемными тестами. Комплексное диагностирование гарантирует достоверность результатов. Тройное тестирование точно доказывает наличие или отсутствие венерической инфекции.

Тестирование спинномозгового содержимого

Диагноз нейросифилис ставят после того, как исследуют ликвор. Такой анализ делают:

• людям со скрытой формой инфекции;
• при симптомах заболеваний нервной системы ;
• бессимптомном, запущенном нейросифилисе;
• выздоровевшим больным с положительными серологическими реакциями.

Направление на исследование ликвора дает врач. Из спинномозгового канала берут пункцию в 2 пробирки. Прокол смазывают йодом, закрывают стерильной салфеткой. После процедуры пациент соблюдает постельный режим на протяжении 2 дней.

В 1 образце определяют количество белка, клеток, следы менингита. Во второй пробе вычисляют антитела к возбудителю сифилиса. Для этого делают тесты: РВ, РМП, РИФ и РИБТ.

В зависимости от того сколько выявлено нарушений, различают 4 разновидности ликвора. Каждая указывает на определенные повреждения нервной системы. Врач диагностирует:

• сосудистый нейросифилис;
• сифилитический менингит;
• спинную сухотку и прочее.

Помимо того, по результатам тестов судят о выздоровлении пациента.

Интерпретация тестов – задача врача. Только он способен сделать правильные выводы, при необходимости назначить дополнительное обследование, поставить точный диагноз. Не стоит делать самостоятельную диагностику при опасной системной патологии. Ошибка в диагнозе влечет за собой серьезные последствия.

Нашли ошибку в тексте? Выделите ее и нажмите Ctrl+Enter , и мы все исправим!

Инфекция заразная, ее развитие может закончиться заболеваниями кожных покровов, слизистых оболочек и лимфатических систем.

Ученые доказали, что бледная трепонема воздействует не только на того человека, у которого диагностировано заболевание – это сказывается на его наследниках. Врачи объясняют это тем, что бактерия сказывается на хромосомы.

Венерическое заболевание протекает в три этапа:

• Первичное – образуются сифилитические язвочки (твердые шанкры) и воспаляются узлы лимфатической системы.
• Вторичное – на кожных покровах появляется сыпь. Появляется высокий риск заразить другого человека.
• Латентное – симптоматика отсутствует, человек остается заразным. Если сифилис диагностируется у беременной женщины, есть высокая вероятность того, что инфекция передастся ребенку.

У 30% пациентов врачи диагностируют сифилис третичного вида. Инфекция тяжело поражает кости, мозг, важные органы и кожу. Для диагностики заболевания человеку необходимо сдать кровь на анализы.

Как исследуют кровь на сифилис?

Чтобы проверить пациента на наличие бледной трепонемы, нужно пройти внешний осмотр, лабораторную диагностику и исследование крови на сифилис. Анализ крови на сифилис позволяет врачам обнаружить в ней специфические (IgG) и не специфические антитела (IgM).

Обнаружить специфические антитела можно с помощью возбудителя сифилиса (бледная трепонема). Такой тест на сифилис называют трепонемным тестом. Не специфические антитела врачи обнаруживают к материалу, который освобождается из разрушенной клетки трепонемы. Такой тест на сифилис могут называть не специфическим антифосфолипидным тестом, RPR-тестом или реагиновым тестом. Эти тесты в современной медицине являются альтернативой для реакции Вассермана.

Оба теста на наличие бледной трепонемы, врачи применяют на первичной диагностике. Они позволяют наблюдать за тем, как инфекция реагирует на лечение.

У трепонемного и RPR-теста есть важное отличие – результат теста у пациента, который выздоровел. Через несколько недель, после успешного лечения, пациенты повторно сдают анализ крови на наличие бледной трепонемы. Показатели RPR-теста будут отрицательными, а трепонемного – положительными, даже после полного выздоровления.

Два теста, которые мы рассмотрели выше – не единственные способы проверить человеческий организм на сифилис. Проверить кровь на наличие сифилисных возбудителей, можно анализами на:

• реакцию Вассермана;
• полимеразную цепную реакцию;
• реакцию иммунофлюоресценции;
• реакцию пассивных агглютинаций;
• иммуноблотингом.

Их широко применяют для диагностических мероприятий и наблюдением за течением заболевания. С предварительным диагнозом сифилис анализ крови сдается натощак. Встречаются ситуации, когда после излечения повторно делается анализ крови, он показывает положительный результат. Врачи называют – сомнительный анализ на сифилис.

Напрашивается вопрос: «Как очистить кровь после сифилиса?» Если после проведения анализа показало положительный результат, это не значит, что в крови имеются возбудители. Анализ реагирует на его липидный компонент, в таких случаях берется кровь на анализ раз в полгода. Врачи назначают определенные процедуры, с помощью которых очищается кровь.

Когда сдавать анализ на сифилис?

Врачи могут назначить сдать анализ на сифилис, если:

• пациент подозревает, что он болен. Пациентов пугают высыпание на половых органах;
• есть положительные результаты анализов на сифилис;
• имел интимную близость с больным на сифилис;
• человек хочет стать донором и ему нужно для этого сдать кровь и сперму;
• человек находится в местах лишения свободы;
• нужно пройти мед.комиссию на работу. Это касается людей, работающих в детском саду или школе, больнице, санаториях, кафе, ресторанах, продуктовых магазинах и т.д;
• человек принимает наркотические вещества;
• у человека диагностировали лихорадку неопределенного генеза или увеличенные лимфатические узлы.

Когда женщина находится в положении, ей необходимо сдавать развернутый анализ на наличие в крови сифилисного возбудителя три раза. Первый сдается, когда беременную женщину ставят на учет в женскую консультацию , второй на сроке 31 неделя и третий перед родами.

Если во время беременности у женщины диагностируют сифилис, после родов малышу назначается обследование, которое поможет определить или исключить врожденный сифилис.

Как сдать анализ на сифилис?

Как делают анализ на сифилис и откуда берут кровь на сифилис?

Чтобы определить в крови наличие бледной трепонемы, врачи берут кровь из вены. Существуют определенные ситуации, когда лаборант может взять кровь из пальца или из спинного мозга.

Сколько по времени делается анализ на сифилис? По времени, готовится анализ на сифилис, по-разному. Результат можно получить через один день, а можно через несколько недель. Это зависит от метода диагностики. Не важно, сколько делается анализ на сифилис, важно какой результат он покажет.

Как подготовиться к анализам на сифилис?

Сдача крови на сифилис – ответственный момент, от полученных результатов зависит жизнь пациента. Время подготовки для сдачи анализов измеряется не днями, а неделями.

1. Исключаем жирную еду за 24 часа до сдачи анализов. Таким образом пациенты очищают кровь от оптического явления в ее крови.
2. Врачи не рекомендуют кушать 7 часов перед сдачей анализов. Действителен анализ на сифилис только на голодный желудок.
3. Категорически запрещено, за сутки до анализов употреблять спиртные напитки и курить. Это может помешать врачам оценить реакцию.
4. За неделю до сдачи крови, нельзя принимать антибиотики.

После проведения анализов, врач назначает лечение от сифилиса. По окончанию терапии, пациенту необходимо повторно сделать анализ крови, чтобы определить насколько очистилась кровь от патогенных бактерий.

Как называется анализ на сифилис, как берут анализ и какой самый точный анализ на сифилис

На сегодняшний день, это самые распространенные вопросы. Сифилис имеет множество неприятных симптомов и клинических проявлений. Чтобы его распознать, пациент проходит комплексное клинико-лабораторное обследование. Общий анализ крови при сифилисе считается бессмысленным. Он не может передать врачам нужную информацию.

Какие анализы сдают на сифилис?

1. Кровь из вены и пальца.
2. Ликвор - врачи берут жидкость из спинного мозга.
3. Врачи берут на анализ материал из твердой язвы, которая образована бледной трепонемой.
4. Из регионарных лимфоузлов берут определенные участки на анализ.

Чтобы подтвердить или исключить диагноз сифилиса анализ крови выбирается врачом. Его выбор основывается на периоде развития болезни.

Классификация лабораторных диагностических мероприятий сифилиса

Когда сифилис находится на первом этапе развития, то пациенты могут сдавать кровь на сифилис для проведения бактериоскопического анализа. В таком случае, врачи определяют бледную трепонему с помощью микроскопа. Также, на сегодняшний день, врачи часто применяют серологический тест. Он определяет микробные антигены и антитела, которые вырабатываются организмом в биологических материалах.

Врачи не диагностируют сифилис путем бактериологического исследования , они не доверяют общему анализу крови. Потому что в питательной среде и в искусственных условиях они плохо растут.

Методы диагностирования трепонем делятся на 2 группы.

Прямой метод исследования направлен на обнаружение самого микроба. Обнаружить его можно с помощью:

• темнопольной микроскопии, которая помогает выявить возбудителя на темном фоне;
• RIT-теста. Исследуемый материал вводится в кролика;
• полимеразной цепной реакции. Она позволяет обнаружить участок генетического материала бактерии. Этот анализ делается дольше всех.

Непрямой метод исследования, как его еще называют серологический, основан на том, чтобы подробно выявить антитела к микробам, которые вырабатываются в организме в ответ на инфекцию.

Затем назначают соответствующее лечение от сиилиса. В свою очередь, непрямой метод делится на 2 группы:

1. Нетрепонемная группа включает в себя:

• реакцию на кардиолипиновый антиген;
• тест быстрого плазменного реагина;
• пробу с толуидиновым красным;

2. Трепонемная группа включает в себя:

• реакцию на комплимент с трепонемными антигенами;
• реакцию на иммобилизацию возбудителей;
• реакцию иммунофлюоресценций;
• реакцию на пассивную гемагглютинацию;
• определение низкомолекулярных соединений;
• определение специфических белков.

В основновном врачи диагностируют сифилис с помощью серологической методики.

Расшифровка анализа крови на сифилис

Как врачи расшифровывают и сколько действителен анализ на сифилис? Мы рассмотрим одну из самых распространенных методик диагностирования сифилиса и ее расшифровку.

Расшифровка анализа на сифилис по методу Вассермана. Этот метод применяется в тех случаях, когда врачам нужны срочные анализы. Если он показывает отрицательный результат, то это не повод радоваться. Есть такое понятие, как ложноположительный результат. Возможно, перед тем как сдавать анализ на сифилис, пациент употреблял спиртные напитки или жирную пищу.

Когда анализ показывает положительный результат, то врач, спустя некоторое время, дополнительное обследование, применяя специфический тест. Определить точность результата поможет интенсивность реакции.

Врач оценивает результаты по количеству плюсов и минусов.

• один или два плюса говорят о слабоположительном результате;
• три плюса - о положительном;
• четыре плюса - о резко положительном;
• минус - об отрицательном.

Также, врач оценивает полученный титр антител. Если он находится в промежутке от 1:2 - 1:800, то можно с уверенностью утверждать, что у пациента развивается сифилис.

Через сколько дней анализ на сифилис считается действительным? Срок годности анализа на сифилис составляет три месяца.