Переливание крови собакам и кошкам. Универсальная группа крови у собак

Для применения в лабораторных условиях

ВАЖНОЕ ПРИМЕЧАНИЕ О ФОРМАТЕ ТЕСТОВОЙ ПЛАТЫ
Просьба внимательно прочесть и соблюдать последовательность этапов.

Вещества, лиофилизованные в лунках с положительным контролем и с пробой пациента, неодинаковы.
Результаты анализа получены только с использованием пробы крови пациента, как в лунке с положительным контролем, так и в лунке с пробой пациента.

Описание и назначение:

Хотя общеизвестен факт, что у собак нет изоантител к несовместимым группам крови, и поэтому они в целом хорошо переносят переливание крови при несовместимости групп, но рациональная ветеринарная практика призывает избегать переливания несовместимых групп крови, за исключением неотложных состояний. Период полувыведения переливаемых несовместимых клеток будет довольно непродолжителен, и поэтому возможно, что должный терапевтический результат не будет достигнут. Также необходимо учитывать потенциальные потребности пациента в будущем. Антитела, получаемые от переливания несовместимой крови, могут образоваться только спустя 5-7 дней, и будут обладать долговременной жизнеспособностью. Это исключает возможность использовать в последствии несовместимую кровь при критическом положении.
К тому же, специалисты по разведению животных должны обратить особое внимание на антитела, вырабатываемые у самок при сенсибилизации в результате переливания крови несовместимых групп. Так как антитела присутствуют в молозиве, то самки с антителами к определенной группе крови не должны скрещиваться с самцами с этой группой крови, если предполагается, что они будут выкармливать будущих щенят. У грудных щенят разовьется гемолиз, обусловленный наличием изоантител, и они могут быть восприимчивы к заболеванию или даже умереть в результате гемолитической анемии. На поверхности эритроцитов собак идентифицированы восемь специфических антигенов. На этих антигенах основывается принятая во всем мире система групповых антигенов крови у собак, «DEA» (Dog Erythrocyte Antigen = Эритроцитарный Антиген Собак). В ней характеризуются восемь общих групп крови, антигены DEA 1.1, 1.2, 3, 4, 5, 6, 7 и 8.
DEA 1.1, 1.2 – наиболее значимые антигены в крови собаки. Оба они высокоаллергенны, но DEA 1.1 – основной литический фактор в гемотрансфузиологии собак. Хотя все группоспецифические антигены системы АВ0 могут стимулировать образование изоантител, DEA 1.1 обладает сильнейшим стимулирующим потенциалом. Поэтому большинство реакций в результате переливания несовместимых клеток происходит, когда DEA 1.1-положительная кровь дается DEA 1.1- отрицательному реципиенту. Клинические значимые реакции при DEA 1.2 могут возникнуть, но слабее, чем при DEA 1.1. DEA7 может быть фактором при трансфузионных реакциях, но так как это холодовый агглютинин и изоантитело природного происхождения, считается, что у него очень низкая клиническая значимость. Считается, что оставшиеся антигены вызывают клинически незначительные проблемы при переливании.
В идеале предполагается, что вся переливаемая кровь DEA 1.1 и 1.2-отрицательная. Некоторые породы, например, борзые, особенно подходят в качестве доноров в связи с тем, что антигены DEA 1.1, DEA 1.2 и DEA 7 встречаются редко. Тем не менее, пока повсеместно не принята концепция банка собачьей крови, при которой кровь можно было бы приобрести незамедлительно, нормой остается переливание от собак, которые представлены в регионе в нужное время.
По оценкам 40% всех собак - DEA 1.1-положительные. Поскольку у некоторых собак происходит аутоагглютинация, и поскольку от очень анемичной собаки могут получиться сомнительные результаты, то прежде чем получать какую-либо информацию, показано типирование. Определение у собаки DEA 1.1-положительность либо отрицательность при рождении намного упрощает принятие решения в будущем. DEA 1.1-положительная собака может получать как DEA 1.1-положительную, так и отрицательную кровь. DEA1.1-отрицательная собака не должна получать DEA1.1-положительную кровь. RapidVet-H (Canine 1.1) предназначен для использования при классификации собак на DEA 1.1-положительных и отрицательных.

Условия проведения процедуры:

• Для получения точных результатов очень важно соблюдать последовательность операций.
• Всегда использовать новую пипетку для нового образца и новую мешалку для новой лунки. Повторное использование любого средства приведет к перекрестной контаминации и неточным результатам.
• Отдельные компоненты системы имеют разную стабильность. Хранить компоненты в соответствии с указаниями на маркировке. Не использовать компоненты после истечения указанного срока годности. Использование материалов с истекшим сроком годности может стать причиной недостоверных результатов.
• Разбавитель поставляется в бутылке с резьбовой крышкой для того, чтобы свести к минимуму непреднамеренное бактериальную либо иную контаминацию. Не использовать разбавитель из других источников в лаборатории.
• Механическая целостность пробы пациента крайне важна для правильности результатов.
• Всегда забирать полный шприц или пробирку с содержанием ЭДТА. Меньшее количество крови приведет к высокой концентрации ЭДТА в анализируемом образце.

Известные мешающие вещества: нет
Утилизация: Все биологические материалы, пипетки и мешалки утилизировать безопасным способом в соответствии со стандартами

Принцип и интерпретация анализа:

Анализ RapidVet-H (Canine DEA1.1) основан на реакции агглютинации, которая происходит, когда эритроцит, содержащий антиген DEA 1.1 на мембране поверхности взаимодействует с мышиным моноклональным антителом, специфичность которого к DEA 1.1 доказана, которое лиофилизуется на тестовой плате. Моноклональное антитело повторно растворяется разбавителем до формы антисыворотки, и тщательно перемешивается с цельной кровью пациента. Все DEA 1.1-положительные эритроциты реагируют с антисывороткой, вызывая агглютинацию. Антисыворотка совершенно не реагирует со всеми DEA 1.1-отрицательными эритроцитами. Результаты определяются визуально.

Внимание: У некоторых собак проявляется аутоагглютинация разной степени в связи с сывороточными факторами, которые вызывают у пациента агглютинацию собственных эритроцитов. Если это проявляется у пациента в опытных условиях, то этого пациента невозможно будет определенно типировать без выделения сыворотки и последовательной промывки оставшихся эритроцитов перед проведением анализа. В RapidVet-H (Canine DEA 1.1) имеется лунка для скрининга таких пациентов.

Реагенты и материалы:

Платы для агглютинационной пробы. На каждой плате имеется 3 визуально определяемых лунки, обозначенных как "Солевой скрининг на аутоагглютинацию", "DEA 1.1 положительный контроль" и "Проба пациента". Платы упакованы в индивидуальную упаковку с этикеткой, в каждой содержится пакет с осушителем. Хранить при комнатной температуре или в холодильнике (2-7°C). 1 бутылка с разбавителем. Прозрачная пластиковая бутылка содержит 0.02 моль/л фосфатного буфера (ФСБ) с pH 7.4. Капельный наконечник дозирует 50 мкл. Хранить при комнатной температуре или в холодильнике (2-7°C).
Пипетки и мешалки. В каждом полиэтиленовом пакете содержатся пластиковые пипетки и мешалки.

Хранение и стабильность:

• Платы для агглютинационной пробы стабильны при комнатной температуре (20-25°C) в течение 19 месяцев с даты изготовления. На каждой тестовой плате пропечатана дата истечения срока годности. Хранение в холодильнике (2-7°C) существенно не увеличивает период стабильности, но не оказывает отрицательного влияния на анализ и защищает от неожиданных или даже неустановленных изменений комнатной температуры вне данного диапазона. Нет необходимости выдерживать тестовую плату при комнатной температуре перед использованием.
• Разбавитель стабилен 24 месяца с даты изготовления. На каждой бутылке нанесена дата истечения срока годности.

ПРИМЕЧАНИЕ: На каждой тест-системе RapidVet-H (Canine 1.1) напечатана дата истечения срока годности, которая представляет собой ближайшую дату истечения срока годности среди компонентов системы. Не смотря на то, что у некоторых компонентов индивидуальные даты истечения срока годности могут быть позднее, их применение с другими компонентами из других систем не рекомендуется.

Последовательность операций:

• ЗАБРАТЬ у пациента минимум 0.4 мкл. крови в шприц или в пробирку, покрытую любо содержащую ЭДТА в качестве антикоагулянта. Для анализа требуется всего 100 мкл. цельной крови.
• ДОСТАТЬ тестовую плату из пластиковой упаковки.
• НАПИСАТЬ на плате кличку/номер собаки и дату проведения анализа.
• ПОМЕСТИТЬ тестовую плату на плоскую поверхность.
• ДОЗИРОВАТЬ 1 каплю разбавителя (50 мкл.) из капельного дозатора в лунку, обозначенную "Солевой скрининг на аутоагглютинацию".
• ВЗЯТЬ небольшое количество пробы пациента в пипетку и поместить 1 каплю (50 мкл.) в лунку, обозначенную "Солевой скрининг на аутоагглютинацию". Эта лунка не содержит реагентов. С помощью мешалки, УВЕРЕННО НАЖИМАЯ ВНИЗ распределить и перемешать материалы по ВСЕЙ лунке в течение примерно 10 секунд. (См. Примечание 1 по правильному использованию пипетки). У небольшого процента больных собак и здоровых собак происходит аутоагглютинация. Если наблюдается аутоагглютинация, ПРЕКРАТИТЬ анализ и перед тем, как продолжить, провести стандартную процедуру промывки клеток.
• ДОЗИРОВАТЬ 1 каплю разбавителя (50 мкл.) из капельного дозатора в каждую из 2 оставшихся лунок. Разбавитель помогает при реконструкции лиофилизованного материала в контрольной лунке и в лунке пациента.
• ВЗЯТЬ небольшое количество пробы пациента в пипетку и поместить 1 каплю (50 мкл.) в лунку, обозначенную "Положительная проба", и 1 каплю – в лунку, обозначенную "Проба пациента". С помощью новой мешалки, УВЕРЕННО НАЖИМАЯ ВНИЗ, распределить и перемешать материалы по ВСЕЙ лунке в течение примерно 10 секунд.
• ПОТРЯСТИ плату поперечным движением в течение 2 минут, обеспечивая перемешивание и "переворачивание" материалов внутри каждой лунки.
• УСТАНОВИТЬ плату под углом 20-30 ° на 2 минуты, чтобы избыток крови сбежал вниз лунки. Этому поспособствует размещение пакета с осушителем в верхней части платы.
• СЧИТАТЬ результаты и отметить лунки, в которых произошла явная агглютинация.

ПРИМЕЧАНИЕ 1: Использование пипетки: Удерживать пластиковую часть между большим и указательным пальцами у плоского заделанного конца, плотно нажать и не ослаблять давление. Удерживать часть для образца вертикально, поместить открытым концом пластиковой части ниже поверхности образца. Ослабить давление пальцев и забрать пробу. Далее удерживать пипетку в перпендикулярном положении прямо над лункой, в которую доставляется проба. Слегка нажать и выпустить одну каплю в лунку (50 мкл.). Дизайн пипетки таков, что выделяется немного более 50 мкл. для компенсации того небольшого количества образца, которое остается на мешалке.
Каждую пипетку использовать один раз, затем утилизировать. Ни при каких обстоятельствах не использовать пипетку повторно, так как может возникнуть перекрестная контаминация, приводящая к неточности результатов анализа.

Результаты:

Если анализ проведен правильно, в лунке, обозначенной "DEA1.1 Положительный контроль", должна произойти визуально определяемая, явная агглютинация.

ПРИМЕЧАНИЕ: Единственное назначение лунки "DEA 1.1 Положительный контроль" – контролировать правильность проведения анализа. Материал, лиофилизованный в лунке "DEA1.1 Положительный контроль" не тот же, что в лунке "Проба пациента".
Если проявляется явная агглютинация пробы пациента в лунке, обозначенной "Проба пациента", то пациент - DEA 1.1-положительный. Если визуально не обнаружено агглютинации в лунке, обозначенной "Проба пациента", то пациент - DEA 1.1-отрицательный. Любая мелкозернистость, гранулярность, появляющаяся спустя 2 минуты, не учитывается при определении результатов. Скорость агглютинации и размер сгустков клеток у DEA 1.1-положительных пациентов может быть разной. В отличие от людей, некоторые животные могут обладать более чем одной первичной группой крови. В таком случае эритроциты могут нести антигены по каждой такой группе. Такое животное будет нести меньше антигенов DEA 1.1, чем животное, у которого в качестве первичной группы крови только DEA 1.1.
Если пациент очень анемичен, то агглютинация образца может быть разъединенной, в форме небольших скоплений, каждое с головку большой булавки, а не в виде явной агглютинации.

Как вы думаете, животные, так же как и мы, имеют разные группы крови?

В 2006 году в австралийском Кингсфорде ротвейлер по имени Цап пожертвовал кровь для немецкой овчарки Рокки. Ветеринары извлекли из Рокки две пули - лохматый друг храбро ринулся на защиту своего хозяина, на которого напали грабители, и те подстрелили отважного пса.

Когда случается беда и нашему любимцу нужна помощь в виде переливания крови, хозяин будет совершенно справедливо обеспокоен, не вызовет ли чужая кровь отторжения у вашего питомца? Поэтому перед переливанием необходимо исследовать совместимость крови донора и акцептора.

Оказывается, и у животных есть разные группы крови. У собак их одиннадцать, у кошек - три, у лошадей - восемь (по некоторым данным - 10), у свиней - шестнадцать, у кур - четырнадцать. Более всего изучены группы крови домашних и сельскохозяйственных животных и птиц.

Собаки

Кровь домашних собак подразделяется на 11 основных групп, отличающихся составом белков в эритроцитах и типом антигена. Они обозначаются цифрами с 1 по 11 и буквами латинского алфавита A,Tr, B, C, D, F, J, K, L, M, N. Большинство собак имеют первую или А-группу.

Кроме того, в крови наших любимцев имеется 6 групп антигенов, которые могут прикрепляться к эритроцитам. Для их обозначения есть международное название: Dog Erythrocyte Antigen и цифровые символы: DEA 1.1, 1.2, 3, 4, 5, 7. Обладатели первых четырех - это универсальные доноры.

Часто собаки определенной породы имеют одну и ту же группу крови - например, 60 % борзых имеют группу DEA 1.1. Но новые группы крови собак все еще обнаруживаются - недавно открыли новую "Да", встречающуюся только у далматинцев.

У собак отсутствует резус-фактор.

Интересно, что при переливании крови порода не важна. Вы можете перелить кровь мопса бассет-хаунду, а левретку спасти, перелив ей кровь шпица или ротвейлера. Главное - соблюдать принципы совместимости, о которых осведомлены ветеринары.

Кошки

Кровь кошек и собак несовместима между собой. У наших "васек" и "барсиков" есть только два возможных антигена - А и В, и они не являются аналогами А и В, которые имеются у человека. Среди кошек нет универсальных доноров или реципиентов, но подавляющее большинство (около 90 процентов) домашних кошек имеют кровь типа А, в то время как более экзотические чистокровные породы часто имеют тип B. Кровь AB также встречается, но очень редко.

Лошади и коровы

Как и у собак, группы крови лошадей обусловлены породой. При этом существует 30 различных групп, представляющих собой комбинации из 8 различных антигенов (A, C, D, K, P, Q и U - эти международно признаны, а "T" все еще исследуются). У коров ситуация намного сложнее - здесь выделяется 11 основных групп крови (A, B, C, F, J, L, M, R, S, T и Z), но группа B включает более 60 различных антигенов.

Зачем животным группы крови?

Зачем определять группу крови? Знания об этом необходимы не только в медицинских целях, а также для установления отцовства, разведения породы и формирования ее структуры, порода важна при импорте и экспорте животного.

Причина появления разных групп крови у животных точно не известна. Что касается людей, то наличие разных групп ученые напрямую связывают с эволюционным отбором относительно формирования иммунитета к болезням. Мы также наследуем наши кровяные антигены от наших родителей.

В комплексе лечения переливание крови имеет очень важное значение. В клинической практике гемотрансфузии применяют с заместительной целью (перелитые эритроциты находятся в крови реципиента 30-120 дней), стимулирующей целью (действует на различные функции животного организма), с целью улучшения гемодинамики (увеличивается ОЦК, усиливается работа сердца, повышается минутный объем сердца и т.д.), гемостатической целью (переливание крови оказывает стимулирующее действие на систему гемостаза реципиента, вызывая умеренную гиперкоагуляцию, обусловленную увеличением тромбопластической и снижением антикоагулянтной функции крови) (О.К. Гаврилов, 1982).

У собак имеется семь групп крови, определяемых по антигенной принадлежности: А, В, С, D, Е, F и G. Фактор А у животных имеет такое же значение, как и резус-фактор у людей. Этот фактор имеется примерно у 60-65% животных. Повторное переливание крови животному, у которого этого фактора нет, может привести к тяжелым гемотрансфузиологическим последствиям – гемолизу крови и гибели животного.

Первое переливание крови, как правило, не вызывает тяжелых осложнений из-за слабо выраженных антигенных свойств факторов В-G. Однако в некоторых случаях могут наблюдаться аллергические реакции в виде крапивницы, зуда и т.п., которые могут развиться сразу (ранняя реакция) и спустя несколько дней (поздняя реакция). Во избежание этих осложнений необходимо проводить пробы на групповую и индивидуальную совместимость. Для этого необходимо к 1 мл сыворотки реципиента добавить 0,1 мл эритроцитов донора. Реакция производится на стекле при температуре 22-25 0 С. учет осуществляют через 5 минут. При отсутствии агглютинации можно приступать к биологической пробе на индивидуальную совместимость.

Биологическая проба на индивидуальную совместимость проводится путем струйного переливания 10-15 мл крови в течение 3 минут крупным породам собак и 3-5 мл – мелким. Проба проводится трехкратно. При этом у животного, по возможности, измеряется артериальное давление, частота пульса, число дыхательных движений до переливания и через 10-15 минут после струйного введения крови. Беспокойство животного, одышка, тахикардия или аритмия, падение давления, рвота, появление болевых ощущений свидетельствуют о несовместимости переливаемой крови.

При переливании крови следует учитывать, что наиболее подходящей для гемотрансфузии является свежая донорская кровь. Заготовленная заранее кровь уже к 10 дню имеет кислую реакцию (рН до 6,0) и содержит калий в высоких концентрациях (до 8 ммоль/л), что может вызвать аритмию и даже остановку сердца. При переливании заранее заготовленной крови ее необходимо подогревать на водяной бане до температуры 37 0 С, т.к. холодная кровь вызывает гипотермию миокарда, спазм периферических сосудов и ацидоз, легко уходит в кровяное депо. На каждые 200-250 мл цитратной крови вводится 5 мл 10%-ного раствора хлористого кальция, 50 мл 40%-ного раствора глюкозы с 4 ед. инсулина и 20-30 мл 3%-го раствора соды (с целью нейтрализации гиперкалиемии и коррекции ацидоза) (А.А. Бунятян, 1982).

Заготавливая кровь, используют глюгицир (50 мл на 200 мл крови), или следующий состав:

Natrii citrici 2,2%

Ac. citrici 0,8%

Aq. destillatae 94,55%

Такой состав используется в количестве 15 мл на 100 мл крови (М. Закиевич, 1994). Кровь с консервантом можно хранить 21 день при температуре 4 0 С.

Забор крови от животного осуществляется путем венепункции толстой иглой и сливанием ее во флакон с приготовленным консервантом. Для предупреждения коагуляции крови в системе, последнюю необходимо предварительно промыть раствором гепарина или глюгициром, или ввести гепарин донору из расчета 100-200 ед. на 1 кг массы тела. Животному-донору предварительно вводят седативные препараты. Система для взятия крови не должна быть длиннее 25-30 см, т.к. кровь собак склонна к гиперкоагуляции и при большей длине трубки сворачивается в системе. Сосуд для сбора крови необходимо постоянно покачивать с целью перемешивания крови и консерванта.

Без ущерба для здоровья животного можно забирать кровь из расчета 10 мл/кг. Переливают кровь капельно с темпом 40-60 кап/мин из расчета 5-18 мл/кг в час. Повторный забор крови можно производить через 1,5-2 месяца.

При необходимости можно осуществлять заготовку трупной крови (от животных, погибших в результате травм). Заготовка крови в этом случае принципиально не отличается от описанной выше. Если забор крови производить из сердца, можно получить 80-90 мл на кг массы тела. Гепарин в этом случае вводится из расчета 120 ед/кг. Кровь от трупа можно забирать до 6 часов с момента гибели животного.

Для заготовки плазмы используют раствор следующего состава:

Ac. citrici 40.0

Ac. chlorici conc. 7 ml

Aq. destillatae 950 ml

На 900 мл крови добавляют 100 мл этого раствора. Кровь отстаивают в течение 1-2 часов, полученную плазму осторожно переливают в стерильные флаконы и запечатывают. При температуре –15 о С плазму можно сохранять в течение 2 лет. Плазма богата белком, переливание ее показано при острых нарушениях свертываемости крови, гипопротеинемии, интоксикации, для повышения коллоидно-осмотического давления крови.

В повседневной практике врачам довольно часто приходится сталкиваться с проведением различных трансфузиологических операций. Мы остановимся на некоторых из них, имеющих наибольшее значение в лечении больных животных.

Реинфузия крови – переливание крови, излившейся в плевральную или брюшную полости. Реинфузия крови является очень эффективной мерой лечения и предотвращает осложнения, связанные с переливанием донорской крови. Показанием для реинфузии является любая кровопотеря, допускающая использование излившейся в полости (плевральная, брюшная и т.д.) крови. Противопоказаниями являются: гнойное загрязнение излившейся крови, загрязнение излившейся крови мочой или кишечным содержимым, кровотечения, связанные с разрывом матки, почечная недостаточность.

Чаще всего врачу приходится иметь дело с реинфузией крови при разрывах легкого, печени, селезенки, внутрибрюшинных разрывов крупных сосудов. Наиболее простой способ сбора излившейся крови заключается в простом вычерпывании ее из полости ложкой или вымакивания марлей (последний способ значительно хуже, т.к. приводит к существенному разрушению эритроцитов). При сборе крови ее сливают в стерильный флакон с одним из стабилизаторов (глюгицир, цитрат натрия и др.), предварительно профильтровав ее через 4 слоя стерильной марли. После этого флакон закрывают и переливают кровь по обычной методике, осуществляя ее микрофильтрацию через фильтр системы для переливания крови.

Вторым способом забора крови для реинфузии является введение перфорированного трубочного дренажа в брюшную или плевральную полость посредством лапаро- или торакоцентеза. Такой способ позволяет собрать и реинфузировать кровь до оперативного вмешательства, что значительно снижает риск анестезиологического обеспечения, особенно при политравмах, сопровождающихся разрывом паренхиматозных органов и массивной кровопотерей. При эвакуации крови из брюшной полости необходимо убедиться в целостности мочевого пузыря (для этого его необходимо катетеризировать до выполнения лапароцентеза). Небольшие же повреждения кишечника, не сопровождающиеся массивным загрязнением собираемой крови, не являются противопоказанием к ее реинфузии (Е.А. Вагнер с соавт., 1977).

Внутрикостные трансфузии достаточны просты в исполнении, могут использоваться в тех случаях, когда внутривенное введение жидкостей затруднено (гнойные поражения кожи, массивные отеки конечностей и т.д.), а также у щенков и котят. Трансфузии осуществляются внутрикостным введением иглы с мандреном (костномозговая игла Кассирского) в эпифизы костей, крыло подвздошной кости. Перед введением иглы выбривают участок кожи, обрабатывают его как операционное поле (во избежание остеомиелита), прокалывают иглой кожу и подлежащие ткани до кости, затем, преодолевая костный кортикальный слой, получают ощущение "провала" иглы, удаляют мандрен, внутрикостно вводят 0,5-2 мл 2%-го раствора новокаина и проводят инфузию растворов под давлением. По окончании манипуляции кожу обрабатывают йодом и кубатолом.

Аутогемотрансфузия – переливание крови больному животному, взятой у него заблаговременно. Обычно такая необходимость возникает при повторном переливании крови, когда предполагается большая операция с массивной кровопотерей. У животного заблаговременно берут кровь (за 1-2 недели до предполагаемой операции), а затем ее же переливают во время оперативного вмешательства.

Реинфузия асцитической жидкости в сосудистое русло возможна у животных, больных циррозом печени, имеющих выраженный асцит, рефракторный к обычной диуретической терапии. Это позволяет избавиться от большого количества жидкости в брюшной полости, сохранив при этом белок, восстановить его уровень в плазме. Технически это выполняется следующим образом: после пункции брюшной полости асцитическую жидкость собирают в стерильный флакон, и тут же вводят ее внутривенно капельно со скоростью 10 мл/кг в час. За 1 сеанс можно реинфузировать от 10 до 30 мл/кг асцитической жидкости. Такие реинфузии могут проводиться 2-4 раза через 1-2 суток.

При острой кровопотере инфузионно-трансфузионная тактика зависит от количества излившейся крови.

Введение жидкостей должно осуществляться в две вены одновременно с введением крови.

При острых заболеваниях органов брюшной полости (перитонит, острая кишечная непроходимость) инфузионно-трансфузионная терапия должна проводиться в течение 1-2 часов перед оперативным вмешательством. При низком центральном венозном давлении, выраженной тахикардии объем вводимой жидкости может достигать 0,5 мл/кг/мин – в первый час и в дальнейшем зависит от показателя ЦВД. Интенсивная терапия должна продолжаться во время операции и в послеоперацинном периоде. Проведение интенсивной терапии в этих случаях должно быть направлено на устранение гиповолемии, коррекцию водно-электролитного баланса и КОС, дезинтоксикацию, восстановление реологических свойств крови.

В повседневную практику современных ветеринарных клиник прочно вошла и стала обычным делом процедура переливания крови - гемотрансфузия. Травмы, огнестрельные ранения, операционные и послеродовые кровотечения, тяжелые желудочно-кишечные кровотечения, отравления, последствия тяжело перенесенного пироплазмоза и множество других заболеваний, сопровождающихся анемией (малокровием) - все это состояния, которые без переливания крови могут закончиться летально. И до недавнего времени так оно и было. Став ежедневной рутинной процедурой, переливание крови спасло жизнь сотням животных. Но для того, чтобы, в случае необходимости, гемотрансфузия была проведена грамотно, без осложнений, связанных с переливанием несовместимой крови, каждый владелец собаки должен знать группу крови своего питомца.

Не секрет, что первое переливание крови в жизни собаки переносится легко в подавляющем большинстве случаев и не приводит к анафилактическим реакциям. Но, начиная со второго переливания, уже необходимо использовать донорскую кровь, совпадающую по основным, наиболее критичным факторам. Учитывая довольно широкое распространение гемотрансфузии на сегодняшний день, все чаще в клинику попадают животные, которые уже имеют в своем анамнезе переливания крови. А владельцам обязательно нужно помнить, что вторая и все последующие гемотрансфузии в жизни Вашего питомца уже будут небезопасны без определения группы крови.

Что же такое группа крови у собаки?

Начнем с того, что такое групповой антиген? Это вещество, а точнее - белок, который присутствует в крови данного организма (на поверхности каждого эритроцита), и который при попадании в другой организм воспринимается им как «чужой». При этом происходит иммунный ответ с выработкой антител. При повторном попадании «чужой» крови иммунный ответ настолько силен, что возникает прямая угроза здоровью и даже жизни пациента.

Группы крови людей и группы крови у собак - это не совсем одно и то же. У людей выделяют два основных (и несколько дополнительных, встречающихся редко) групповых антигена: А и В. Кроме того, у людей определяют еще резус-фактор, который тоже обладает антигенными свойствами, и который в крови человека либо есть, либо нет. Таким образом, у людей основных групп крови четыре: 0(I), А(II), В(III), АВ(IV), каждая из которых может быть резус-положительной или резус-отрицательной.

У собак резус-фактора нет, а групповых антигенов известно уже более десятка. Их фактическое число и роль в организме собаки, антигенные возможности и биологические свойства еще долго будут предметом изучения специалистов.

На сегодняшний день для известных групповых антигенов собак принято международное обозначение: DEA - Dog Erythrocyte Antigen. Отдельные антигены (или групповые факторы) обозначают цифрами: DEA 1.1, DEA 1.2, DEA 3, 4, 5 и т.д.

ДЛЯ УСПЕШНОЙ ГЕМОТРАНСФУЗИИ ВАЖНО ЗНАТЬ ФАКТОР DEA 1.1 !

Именно DEA 1.1 обладает сильнейшими антигенными свойствами, так как способен вызывать мощные иммунные реакции. Остальные групповые факторы собак на практике не ведут, в случае несовместимости, к таким тяжелым клиническим осложнениям.

Наша лаборатория имеет возможность определять фактор DEA 1.1. Он или есть в крови собаки (собака DEA 1.1 - положительная), или его нет (DEA 1.1 - отрицательная). Согласно европейской статистике, около 45% собак являются DEA 1.1 - положительными, остальные - отрицательными.

Собаки, положительные по DEA 1.1, являются универсальными реципиентами , то есть им можно переливать кровь любой другой собаки, но в идеале, от собаки DEA 1.1 + (уточним, что собака-донор должна быть абсолютно здоровой, и не иметь в анамнезе переливаний крови). Собака DEA 1.1 + может быть донором только для такой же, DEA 1.1 - положительной собаки.

Собаки, отрицательные по DEA 1.1, являются универсальными донорами , то есть их кровь можно переливать другим собакам, а им самим только такую же, DEA 1.1 - отрицательную кровь. Но опять же, в идеале, переливать кровь лучше от положительной собаки - положительной и от отрицательной - отрицательной.

Что будет, если отрицательной собаке перелить положительную кровь? Изначально в крови такой собаки антител к фактору DEA 1.1 нет, поэтому первое переливание практически всегда проходит успешно, без клинически выраженных иммунных реакций. Но такая собака на всю жизнь остается чувствительной к данному, чужому для нее, веществу, так как в ее крови образовалась «армия» соответствующих антител. Повторное переливание крови, если оно проводится наугад, без учета группы крови, может оказаться для этой собаки смертельным. И, кроме того, если такая собака - сука, то владельцам следует избегать вязок с DEA 1.1 - положительными кобелями, ведь часть ее потомства окажется положительными. А так как антитела матери легко проникают через плацентарный барьер к плодам, а также содержатся в молозиве, новорожденные щенки будут страдать гемолитической анемией и могут погибнуть, возможна также внутриутробная гибель плодов.

Итак, в определении группы крови нуждается каждая собака! И то, какой у нее фактор DEA 1.1: положительный или отрицательный, должно быть указано в ветеринарном паспорте. Ответственные владельцы собак беспокоятся о будущих потребностях своего питомца заранее!

Владельцы собак, отрицательных по DEA 1.1, помните: ваша собака может стать настоящим героем-спасителем для чьего-то любимца, ведь она - универсальный донор!

Терапевтическое введение компонентов крови

Введение компонентов крови часто необходимо как дополнительное лечение щенков и котят. Обычно

используется цельная кровь, эритроцитарная масса и плазма. Показаниями для использования свежей цельной крови являются геморрагический шок, анемия, сильное травматическое кровотечение, патология крови (тромбоцитопения или плохая свертываемость крови) и неиммунная гемолитическая анемия. Исключая кровотечения, во всех остальных случаях правильно сохраненная цельная кровь может быть заменой свежей цельной крови. Обычное лечение большинства анемий у котят и щенков также может быть дополнено переливанием эритроцитарной массы. Плазма в основном используется для улучшения свертываемости крови и при сильном дефиците белка.

Сбор цельной крови

Самым безопасным и доступным местом для забора цельной крови является яремная вена. Количество крови, которое может быть безопасно собрано через яремную вену от донора собаки или кошки, составляет свыше 22 мл/кг веса тела каждые 2 недели. Доноры могут находиться под действием седативных препаратов, а место сбора хирургически подготовлено. Контейнер для крови должен быть расположен выше пластикового аппарата по переливанию крови и может быть перемещен только после введения иглы в вену. Игла должна быть чистой, чтобы обеспечивать хороший кровяной поток и минимизировать активацию тромбоцитов, свертываемость и загрязнение тканей. Когда полный объем крови собран, трубка отсоединяется перед извлечением иглы из вены. Прямое давление должно прикладываться к месту сбора еще в течение 5-10 минут для гемостаза.

Кровь лучше всего собирать в пластиковые мешки с растворами цитрата-фосфата аденина (ЦФА) или ацид-цитрата глюкозы (АЦГ). Отношение объема антикоагулянтов (ЦФА и АЦГ) к объему крови составляет 1:7 для сохранения всех компонентов (в ЦФА собачья и кошачья кровь сохраняются 28 дней при температуре 28° С, а в АЦГ - 21 день при той же температуре). Если кровь переливается непосредственно после сбора, то добавляются разбавленные 1:10 антикоагулянты. Если используется гепарин, то 625 единиц гепарина добавляют на каждые 50 мл собранной крови. Для удобства последующих процедур кровь собирают в пластиковые мешки в количестве 450 мл ЦФА или АЦГ-антикоагулянта, с обязательным перемешиванием. Для контроля за количеством собираемой крови используются тройчатые равновесные или десятичные электронные весы. 1 мл крови весит примерно 1 г, поэтому 450 мл крови весят примерно 450 г плюс вес мешка и антикоагулянтов. После сбора соединительная трубка убирается, а содержимое мешка перемешивается. Затем собранная кровь используется сразу или хранится при соответствующей температуре для последующего применения.

Если сразу необходимо небольшое количество собранной крови, то в пластиковый шприц объемом 50 мл набирается 7 мл антикоагулянта, а остальной объем заполняется кровью. Кровь из любого открытого резервуара, будь то шприц или пластиковый мешок с уже введенной иглой, должна использоваться в течение 24 часов.

Сбор эритроцитов и плазмы

Сбор эритроцитов требует системы из двух или трех мешков, когда один из них служит для сбора цельной крови, а два других являются дополнительными для эритроцитов. Это позволяет держать собранную кровь закрытой во время сепарации. После сбора цельной крови эритроциты и плазма должны быть отделены от нее. Кровь, собранная в пластиковый мешок с антикоагулянтами, в охладителе, наполненном льдом, отправляется на местное предприятие для переработки. Кровь не должна соприкасаться со льдом. На предприятии по переработке крови мешки с кровью и антикоагулянтами помещаются в центрифугу при температуре 4° С и сепарируются со скоростью 5000 оборотов в минуту в течении 10 минут. Отделенная плазма помещается в дополнительный мешок, а оставшиеся эритроциты маркируются и хранятся 21 день.

Свежезамороженной является плазма, охлажденная в течении 8 часов после сбора крови, она используется в основном для поддержания свертываемости крови (при гемофилии А, болезни Виллибранда, отравлении родентицидом, синдроме диссеминированной внутрисосудистой свертываемости). Она должна быть заморожена и храниться при температуре -70°С для оптимального сохранения фактора свертываемости в течении 1 года или в конвенционном холодильнике 3 месяца. После 1 года хранения плазма не используется для поддержания фактора свертываемости, хотя может применяться для лечения гемофилии В (требуется фактор IX) или отравления родентицидом (требуются факторы II, VII, IX и X), или может храниться еще 5 лет при той же температуре.

Группы крови

Группа крови у собак не играет большой роли при переливании крови от животного с той же группой, но может встречаться несовместимость антигенов плазмы. Группа крови помогает минимизировать угрожающую жизни реакцию при переливании не подходящей крови (табл. 1 и 2). Это особенно важно для кошек, которые в отличии от собак имеют естественные антитела против крови других групп. У животных-доноров необходимо определять группу крови. Знание группы крови также может быть важно для животных, предназначенных для разведения, чтобы предотвратить изоэритролиз (особенно важно для кошек).

Таблица 1 Группы крови у собак

* Собачий эритроцитарныи антиген

Аллоантитела проходят через молозиво в первые 16 часов после рождения котят, и все котята с группой В (в меньшей степени с группой А) имеют эти антитела уже в возрасте нескольких недель. Таким образом, кошки не нуждаются в повышении чувствительности ни при первом переливании крови, ни в период беременности, чтобы развить аллоантитела, и отрицательная реакция может быть при первом переливании или у котят первого помета данной кошки. Возможно рождение котят с группой А от кошки с группой В и кота с группой А. У собак, от суки с эритроцитарным антигеном (СЭА) 1.1 отрицательным и кобеля с СЭА 1.1 положительным могут родиться щенки с СЭА 1.1 положительным. Если такое происходит или суке переливали эритроциты и она чувствительна к СЭА 1.1, антитела к СЭА 1.1 проходят через молозиво. Щенки, нормальные при рождении, могут давать иммунно-промежуточную гемолитическую анемию в возрасте 3-10 дней.

Таблица 2 Группы крови у кошек (noGriot-Wenk and Giger, 1995)

Перекрестные пробы, на совместимость

Дополнительно при определении группы крови у домашних собак и кошек могут выполняться, если возможно, перекрестные пробы на совместимость. Невосприимчивость, выявленная перекрестными пробами, показывает раннюю чувствительность реципиента (у собак) или естественное появление изоантител (особенно важно для кошек). Щенкам и котятам, нуждающимся в повторном переливании крови, необходимо давать кровь от доноров, с которыми у них есть перекрестная совместимость.

Перекрестные пробы выполняют для определения мажорной и минорной совместимости. При тесте на мажорную совместимость главное взаимодействие происходит между донорскими клетками и сывороткой реципиента, когда определяется, имеет ли реципиент антитела на донорские клетки. При тесте на минорную совместимость исследуют взаимодействие клеток реципиента и сыворотки донора, выделяя антитела в донорской сыворотке против клеток реципиента, что имеет меньшее значение. Оба теста проводятся на свежей крови, потому что анти-СЭА антитела фиксируются дополнительно. Переливание крови производится при главной совместимости.

Образцы крови по 5 мл берутся у донора и реципиента, крови позволяют свернуться. После центрифугирования сыворотка помещается в отдельные пробирки, а кровяной сгусток осторожно разбивается и 0,3 мл клеток отделяется от каждого образца и помещается в пробирки, в каждой из которой содержится по 9,7 мл обычного соляного раствора. Клетки должны быть смочены соляным раствором, чтобы удалить плазму и предотвратить образование фибриновых сгустков. После смачивания всплывшую массу удаляют, а оставшиеся клетки помещают в раствор - 0,3 мл клеток на 9,7 мл соляного раствора. Мажорная совместимость проявляется при добавлении 0,1 мл сыворотки реципиента к 0,1 мл суспензии с донорскими клетками, минорная совместимость - при добавлении 0,1 мл донорской сыворотки к 0,1 мл клеток реципиента. Контрольная реакция производится между сывороткой реципиента и смоченными клетками. Каждый тест проводится три раза и выдерживается (инкубируется) по 15 минут: один набор при температуре 37°С, другой при комнатной температуре и третий при температуре 4°С. Инкубация при различных температурах необходима, потому что реакция несовместимости может произойти при разных температурах.

После инкубации каждая пробирка центрифугируется в течение 1 минуты при скорости 280 об/минуту, и всплывшие массы проверяются на гемолиз. Пробирки осторожно встряхиваются, чтобы проверить агглютинацию эритроцитов. Кровь совместимых групп не показывает ни агглютинации, ни гемолиза. Если агглютинация не отмечена, то небольшое количество материала кладется на чистое смотровое стекло для проведения микроскопического анализа. Любая степень агглютинации или гемолиза при мажорной совместимости является показателем несовместимости, и переливание не производится. Если небольшая агглютинация или гемолиз проявляется при минорной совместимости, то переливание возможно в критическом случае.

Назначение компонентов крови

Перед применением сохраняемые компоненты крови должны быть подогреть! до комнатной температуры, чтобы не вызвать гипотермию у реципиента. Для подогрева используется трубка, свернутая спиралью и помещенная в водяную баню с температурой воды 37-38°С. Также контейнер с компонентами крови можно поставить в водяную баню или сухой инкубатор с постоянной температурой, или же замороженная плазма может быть медленно подогрета в конвенционной микроволновой печи. Лишнее тепло не нужно при подогревании компонентов крови, потому что фибриноген осаждается при температуре 50°С, а аутоагглютинация начинается при повышении температуры больше 45°С.

Если компоненты крови открыты или в контейнер уже введена игла, или они подогреты до 10°С или больше, содержимое контейнера должно быть использовано в течении 4 часов в связи с ростом бактерий. Подогретые компоненты крови не могут быть возвращены в хранилище.

Микроволновое размораживание плазмы оказывает на плазменный белок определенное воздействие, поэтому ее предпочтительнее размораживать в водяной бане.

При переливании должны использоваться соответствующие фильтры и оборудование. Фильтры необходимы для задержки кровяных сгустков и лейкоцитно-пластинчатых агрегатов, чтобы не вызвать микроцыфаркты в легких как возможное осложнение при переливании крови. Большинство переливаний крови требуют фильтра с диаметром пор 170 мм. Кровь в шприце также должна проходить через стандартный набор с соединителем Льюера.

Для больших щенков компоненты крови назначаются внутривенно через головную или яремную вены с применением постоянного катетера 20 G. Для маленьких щенков и больших котят используют катетер 22 G, который также вводят в головную или наружную яремную вену. Также маленьким щенкам и котятам можно делать переливание крови в головную и внешнюю яремную вену с использованием набора для переливания крови 23 G. Чтобы снизить вязкость при использовании маленьких игл, компоненты крови можно перемешать с 0,9%-ным раствором NaCI перед или во время переливания. Использование других растворов не рекомендуется. Гипотермичным, дегидратированным щенкам и котятам младше 3 месяцев, которым часто невозможно внутривенное вливание, переливание крови можно осуществлять внутрикостно. Поглощение перелитых компонентов крови происходит очень быстро - примерно 95% за 5 минут.

Перед переливанием должны быть получены все показатели состояния организма - вес тела, температура, пульс, дыхательная частота, цвет слизистых оболочек, общий объем кровяных клеток и концентрация плазменного белка. Начальная скорость при переливании должна составлять 0,25 мл/кг веса тела в течении 30 минут, когда за реципиентом нужно внимательно наблюдать для получения реакции на переливание крови. Благодаря малой начальной скорости переливания, в кровь реципиента проникнет минимальное количество несовместимых компонентов, но их будет достаточно для явной реакции на чужую кровь. Если в течении первых 30 минут никаких проблем не возникло, скорость переливания повышают. Но эта практика не применяется для кошек с кровью группы В, потому что даже 1 мл крови группы А может вызвать смерть. У кошек, породы которых имеют кровь группы В, обязательно должна быть определена группа крови.

Требуемый объем крови обычно переливается за 3 - 4 часа. Это правило достаточно гибко, потому что скорость переливания зависит от физических условий и гидратационного состояния реципиента. Для гиповолемичного реципиента возможна скорость выше 22 мл/кг в час. Перегруженность сосудистой системы, постоянная проблема даже у здоровых реципиентов, может быть осложнена у пациентов с сердечной и почечной недостаточностью. Щенки и котята с сердечной недостаточностью могут не выдержать скорость переливания крови, превышающую 4 мл/кг в час.

Количество необходимой цельной крови определяется просто: 2,2 мл/кг переливаемой цельной крови увеличивают общий клеточный объем на 1%, если объем переливаемой крови составляет 40%. Эритроциты (при гематокрите 60-80%) переливают так же, как и цельную кровь. Эритроциты должны быть растворены в 0,9%-ном растворе NaCI перед переливанием. Для этого в обычный 0,9%-ном раствор NaCI добавляются эритроциты в количестве 0,5-1,0 мл/мл. Количество физиологического раствора определяется по состоянию сосудистой системы и гидратационному статусу реципиента.

Если свежая, свежезамороженная и замороженная плазма назначается пациенту с сильным кровотечением для усиления свертываемости крови, то ее доза составляет 6-10 мл/кг веса тела 2-3 раза в день в течение 3-5 дней, пока кровотечение не остановится.

Осложнения при переливании крови

Хотя осложнения при переливании крови у щенков и котят достаточно редки, но все же случаются. Может быть гемолитическая реакция на несовместимые эритроциты, переливаемые реципиенту, у которого уже есть антитела изначально или они появились после первого переливания. У кошек с группой крови Б, у которых уже есть антитела на группу А, может быть очень сильная гемолитическая реакция уже при первом переливании. Большинство гемолитических реакций у щенков замедленны и проявляются в виде укорочения жизни эритроцитов после переливания и развития положительной реакции на тест Кумбса. Гемолиз также может случиться при переливании перегретых или холодных компонентов крови, параллельном назначении гипотонических растворов, механических повреждениях эритроцитов негодным оборудованием при сборе крови, хранении и переливании или при переливании под давлением через маленькую иглу или катетер, или фильтр.

Нежелательными результатами лейкоцитарной и тромбоцитарной несовместимости, а также белков плазмы являются судороги, неврологические симптомы, рвота и крапивница. Для снижения этих реакций применяется терапевтическая подготовка дифенгидрамид гидрохлоридом в количестве 2 мг/кг веса тела. Лихорадочная реакция бывает довольно редко и достаточно слабая. Септическая реакция при стерильном сборе крови и правильном хранении случается довольно редко.