Бледная трепонема под микроскопом. Спирохета бледная

Treponema — род бактерий, объединяющий многочисленные виды, из которых самым распространенным является возбудитель сифилиса — treponema pallidum (трепонема паллидум, бледная трепонема). В этот род также входят возбудители фрамбезии и пинты. Treponema pallidum является спиралевидной бактерией семейства Spirochaetiaceae (спирохеты), вызывающей инфекционное венерическое заболевание - . Патология отличается волнообразным течением и проявляется характерной клиникой. Заражение происходит преимущественно половым путем, благодаря чему сифилис относится к ИППП.

В настоящее время в мире регистрируется огромное количество венерических заболеваний, которые представляют реальную угрозу для жизни человека. Treponema pallidum — опасный микроб, вызывающий системное заболевание, поражающее кожу и внутренние органы. На месте внедрения спирохеты образуется первичный патологический очаг — . Затем на коже появляются сифилитические высыпания, увеличиваются регионарные лимфатические узлы. При отсутствии адекватной терапии поражаются внутренние органы, развиваются необратимые изменения, возможен летальный исход.

Treponema pallidum

Морфология

Treponema pallidum - грамотрицательный микроорганизм, имеющий форму тонкой спирали, скрученной в 8-12 мелких завитков. Свое название бледная трепонема получила благодаря способности не воспринимать обычные лабораторные красители.

Спирохета является строгим анаэробом, хорошо растущим в бескислородной среде. Но не смотря на это, жизнеспособность бактерий сохраняется на окружающих бытовых предметах в течение 3 и более дней. Трепонема имеет жгутики и фибриллы. Благодаря им и собственным сокращениям клетки бактерия совершает поступательные, вращательные, сгибательные, волнообразные, винтообразные и контрактильные движения. Она быстро проникает в живые клетки и стремительно размножается в них поперечным делением.

Бледная трепонема имеет трехслойную клеточную стенку, цитоплазму и органеллы: рибосомы, мезосомы, вакуоли. Рибосомы синтезируют белки, а мезосомы обеспечивают дыхание и обмен веществ. Ферменты и антигены содержатся в цитоплазматической мембране. Тело бактерии покрыто слизистой бесструктурной капсулой, выполняющей защитную функцию.

Физические свойства

Микробы устойчивы к низким температурам и чувствительны к высоким. При нагревании они гибнут в течение 20 минут, при высыхании в течение 15 минут, а при кипячении — мгновенно. Антисептики и дезинфектанты быстро уничтожают бледную трепонему. Губительное действие на бактерию оказывают: ультрафиолет, свет, спирт, щелочи, уксус, мышьяк, ртуть, хлорсодержащие дезинфицирующие средства. Treponema pallidum устойчива к некоторым антибиотикам.

Бледная трепонема проявляет свои патогенные свойства во влажной и теплой среде. В организме человека излюбленным местом размножения являются лимфатические узлы. На стадии вторичного сифилиса микробы концентрируются в крови и проявляют свои патогенные свойства.

Культуральные свойства

Трепонема паллидум не растет на искусственных питательных средах, в культуре клеток и куриных эмбрионах. Ее культивируют в яичках кролика. В этих клетках микроб хорошо растет и размножается, полностью сохраняя свои свойства и вызывая у животного орхит.

Существуют обогащенные питательные среды, предназначенные для выделения чистой культуры. Микробы на них растут под толстым слоем вазелинового масла. Таким способом получают антитела, необходимые для постановки специфических реакций на сифилис.

Трепонемы растут на кровяном или сывороточном агаре в бескислородной среде. При этом они теряют свои патогенные свойства, но сохраняют антигенные. Патогенные трепонемы способны ферментировать маннит, утилизировать лактат и образовывать специфические метаболиты.

Патогенность

К факторам и компонентам патогенности и вирулентности бактерий относятся:

Белки-адгезины, обеспечивающие фиксацию микроба на клетке-хозяина,
Миофибриллы, способствующие глубокому проникновению в организм и миграции бактерии в теле хозяина,
Образование L-форм,
Липополисахариды наружной мембраны,
Фрагменты болезнетворной клетки, проникающие вглубь тканей,
Способность внедряться в межклеточные соединения эндотелия,
Антигенная изменчивость.

Трепонема паллидум оказывает прямое токсическое действие на синтез макромолекул — ДНК, РНК и белков. Антигены Т. pallidum используются в реакции Вассермана для серодиагностики сифилиса. При неблагоприятных условиях спирохета трансформируется в L-формы, которые обеспечивают ее устойчивость к антибактериальным средствам и антителам.

Эпидемиология

Сифилис - строгий антропоноз. Инфекция персистирует только в организме человека, который является ее естественным резервуаром в природе. Входными воротами инфекции являются: поврежденный плоскоклеточный или цилиндрический эпителий ротовой полости или половых органов.

Распространение инфекционных агентов происходит:

Половым путем во время полового акта через сперму,
Бытовым путем через белье, средства гигиены, косметические принадлежности, при поцелуе,
Вертикальным путем от инфицированной матери ребенку во время родов, а также через молоко при кормлении грудью,
Трансплацентарным путем на поздних сроках беременности,
Гематогенным путем при прямом переливании крови, во время операций, при использовании общего шприца у наркоманов.

Риск инфицирования повышен у медицинских работников — стоматологов, косметологов. Заражение происходит при проведении медицинских манипуляций и процедур, повреждающих кожные покровы. Заражаются treponema pallidum лица, ведущие беспорядочную половую жизнь, имеющие несколько половых партнеров, пренебрегающие барьерными методами контрацепции. Для того, чтобы произошло инфицирование, у больного в секрете должно быть много бактерий, а у партнера - должны присутствовать повреждения на слизистой оболочке.

первые проявления болезни

Больной максимально заразен в периоды первичного и вторичного сифилиса, когда на коже и слизистой половых органов появляются первые признаки болезни. В это время в окружающую среду выделяется много спирохет.

В настоящее время регистрируется большое число больных с экстрагенитальными шанкрами, расположенными на слизистой рта, глотки, ануса. У них высыпания локализуются на лице, сифилиды — на ладонях и подошвах. Третичный период сифилиса в последнее время развивается в очень редких случаях и протекает практически бессимптомно.

Симптоматика

Инкубация характеризуется миграцией бактерий по лимфатическим и кровеносным сосудам и их активным размножением в лимфоузлах. Продолжительность периода - от 3 недель до 3 месяцев.

Врожденный сифилис развивается в результате внутриутробного заражения плода. Эта тяжелейшая патология проявляется характерной триадой симптомов у ребенка: врожденной глухотой, кератитом, гетчинсоновыми зубами.

Диагностика

Диагностика сифилиса включает опрос и осмотр пациента, сбор анамнестических сведений, а также клинические испытания, которые играют важную роль в обнаружении бледной трепонемы и постановке диагноза.

Микроскопическое исследование биоматериала. Бактериоскопию мазка-отпечатка шанкра или биоптата лимфатического узла проводят в первые 4 недели болезни. Для получения качественного мазка поверхность эрозии и язвы обрабатывают физраствором, производят соскоб и из полученного материала готовят препарат для микроскопии. Мазок окрашивают по Романовскому-Гимзе. Трепонема имеет бледно-розовый цвет. Живые микробы в неокрашенном и нефиксированном мазке не видны в световой микроскоп. Для их обнаружения применяют темнопольную или фазовоконтрастную микроскопию. Для проведения темнопольной микроскопии берут материал из сифилитической язвы и исследуют его в специальном аппарате. Бактерия обладает способностью преломлять свет: в микроскопе она имеет вид белой спиралевидной полоски. Для обнаружения трепонем в различных клинических материалах применяется также люминесцентная микроскопия.

Лечение

Лечением сифилиса занимается врач-дерматовенеролог. Он подбирает терапию индивидуально с учетом стадии, клиники болезни и особенностей пациента. Комплексное лечение способствует полному выздоровлению, которое должно подтверждаться лабораторно.

Лечение сифилиса этиотропное, направленное на уничтожение возбудителя — treponema pallidum. Больным назначают большие дозы антибиотиков, к которым чувствителен данный микроб. Обычно используют пенициллины «Бензилпенициллин», тетрациклины «Доксициклин», макролиды «Кларитромицин», «Сумамед», цефалоспорины «Цефазолин», фторхинолоны «Ципрофлоксацин». Антибактериальную терапию продолжают 2 месяца. Лечение беременных женщин проводят также.

Иммуностимуляция, витаминотерапия, физиопроцедуры дополняют этиотропное лечение и помогают больным восстановиться после болезни. Превентивная терапия проводится половому партнеру и лицам, контактировавшим с больным.

Видео: дерматовенеролог о лечении сифилиса

Профилактика

Профилактические мероприятия заключаются в соблюдении личной гигиены, использовании отдельного белья и посуды, индивидуальных косметических средств. Рекомендуется сразу после незащищенного полового акта обработать раствором хлоргексидина или альбуцида половые органы или другие части тела, с которыми произошел контакт. Эти средства необходимо иметь в домашней аптечке.

С профилактической целью обследуют:

Доноров,
Беременных женщин,
Работников детских садов, школ, общепита и лечебно-профилактических учреждений,
Больных, поступающих на стационарное лечение.

Современная противомикробная терапия позволяет избавиться от патологии и делает прогноз заболевания благоприятным. Только врач-дерматовенеролог сможет подобрать правильное и достаточное лечение, соответствующее стадии болезни. Заниматься самолечением сифилиса категорически запрещено. Не до конца излеченная патология может перейти в хроническую форму. Такой больной опасен для окружающих лиц.

Сифилис – социальный недуг, к лечению которого нужно подходить серьезно и ответственно.

Видео: сифилис в программе «Здоровье»

Сифилис представляет собой хроническое инфекционное заболевание, вызываемое бледной спирохетой, поражающее с различной степенью интенсивности все органы и системы человеческого организма и способное передаваться от больной сифилисом матери плоду в эмбриональном периоде.

Название «сифилис» было введено в 1530 г. прямом Фракастро. Врач Бетенкур в 1527 г. назвал сифилис morbus veriereus или lues venerea, подчеркнув этим предпочтительно половой способ заражения.

Вопрос о времени появления и происхождении сифилиса не может считаться разрешенным. Одни считают, что сифилис привезен в Европу из Америки в конце XV веча, другие полагают, что сифилис существовал в Старом Свете еще задолго до нашей эры.

Возбудитель сифилиса, отличительные признаки его и методы обнаружения

Заразительность сифилиса была очевидна уже для первых врачей, наблюдавших это заболевание. Однако найти возбудителя долго не удавалось.

3 марта 1905 г. Ф. Шаулнн совместно с Э, Гоффманом в отделяемом из папулы на половых органах обнаружили слабо преломляющую свет спирохету, признанную возбудителем сифилиса и названную ими бледной спирохетой (Spirochaeta pallida).

Бледная спирохета (или трепонема)

представляет собой нежное штопорообразное тонкое образование с многочисленными (в среднем 8-12) завитками. При увеличении около 1 000 раз, каким обычно пользуются в современных лабораториях, в темном поле зрения бледная спирохета напоминает тоненькую спираль или штопор с правильными завитками, характеризующимися равномерностью и небольшой крутизной (рис. 45). Обращает на себя внимание прежде всего плавность ее движений, отсутствие стремительных рывков. Спирохета как бы плывет в поло зрения вперед, вращаясь вокруг своей продольной оси и совершая маятникообразные движения. Она обладает упругостью и. то сжимаясь, то распрямляясь, толкает находящиеся перед ней в препарате форменные элементы.

Толщина бледной спирохеты достигает 0,25 микрон., а длина - 6-20 микрон и больше.

Рис. 45. Бледные спирохеты (увеличение 900).

Иначе выглядит бледная спирохета в поле зрения электронного микроскопа. При увеличении в 4 500 раз и больше правильность и равномерность завитков бледной спирохеты утрачиваются. Толщина и окраска ее тела неравномерны; концы имеют более светлую окраску (рис. 46). При увеличении до 15 000 раз удается обнаружить мембрану, представляющуюся в виде оболочки.

Рис. 46. Бледная спирохета в электронном микроскопе (увеличение 15 000).

Бледная спирохета сохраняет подвижность в закрытой влажной камере. Холод, тепло и свет действуют не нее угнетающе. Из химических веществ наиболее сильное действие на бледную спирохету оказывает сулема, которая в разведении 1: 1 000 убивает ее моментально (К. Р. Аствацатуров и П. Д. Юшков). Так же действует и фенол в концентрации 1: 100-1: 200 и трикрезол в концентрации 1: 500.

Получены культуры бледной спирохеты.

Нахождение бледной спирохеты

Очень важный момент в постановке диагноза сифилиса, а результат лабораторного анализа обычно является решающим обстоятельством, заставляющим приступить к противосифилитическому лечению.

Наилучшим методом обнаружения бледной спирохеты является исследование свежего препарата в темном поле. При этом живая спирохета сохраняет не только все свои характерные морфологические признаки, но и особенности движения. Это позволяет легко отдифференцировать ее от других спирохет, похожих на нее, но ничего общего с ней не имеющих.

Для исследования в затемненном поле зрения пользуются микроскопом, у которого обычный конденсор заменен специальным. Из методов окраски бледных спирохет наиболее принят способ Романовского-Гимза.

Быстрее можно приготовить препарат по Бурри: каплю исследуемой жидкости смешивают с каплей китайской туши на тщательно обезжиренном предметном стекле и краем другого стекла распределяют тонким ровным слоем на предметном стекле, как это обычно делается при приготовлении мазков крови. Высушенный на воздухе препарат исследуют под иммерсионной системой. На равномерном серовато-черном фоне бледные спирохеты имеют вид серебристо-белых спиралей.

При описанных методах исследования с целью обнаружения бледных спирохет чрезвычайно важную роль играет способ взятия материала.

Нужно помнить, что под влиянием дезинфицирующих средств бледная спирохета легко исчезает с поверхности сифилитического поражения, и обнаружить се в этих случаях в отделяемом язвочки или эрозии бывает почти невозможно. Поэтому если в день исследования или накануне очаг поражения подвергался воздействию каких-либо дезинфицирующих средств, то нужно сутки или двое прикладывать индифферентные вещества и лишь после этого брать материал для исследования. Лучше всего применять примочки с физиологическим раствором или повязки с диахиловой мазью (Unguentum, Diachylon). Когда больной является для исследования, язву (эрозию) очищают ватным тампоном, смоченным чистым бензином. Это освобождает поверхность поражения от посторонней флоры и раздражает основание поражения, способствуя появлению из глубины тканей жидкости и вымыванию оттуда спирохет. Появившуюся тканевую жидкость берут для исследования па спирохету по одному из описанных выше способов.

Если нет возможности на месте произвести анализ на наличие бледной спирохеты, то полученную тканевую жидкость всасывают в капиллярную часть пастеровской пипетки, запаивают с обоих концов на пламени или закрывают воском и отсылают в лабораторию. Препараты можно с успехом исследовать в темном поле.

В случае отрицательного результата поисков бледной спирохеты необходимо брать материал из увеличенного регионарного бубона путем прокола его иглой и аспирации тканевой жидкости шприцем. Добытый таким путем пунктат исследуют на бледную спирохету.

Содержание статьи

Бледная трепонема

Морфология и физиология

T.pallidum имеет форму спирали, протоплшматический цилиндр, который скручен в 8-12 завитков. От концов клетки отходят 3 периплазматических жгутика. Бледная трепонема плохо воспринимает анилиновые красители, поэтому ее окрашивают краской Романовского-Гимза. Однако наиболее эффективным методом является ее изучение в темнопольном или фазовоконтрастном микроскопе. Микроаэрофил. На искусственных питательных средах не растет. Т. pallidum культивируют в ткани яичка кролика, где она хорошо размножается и полностью сохраняет свои свойства, вызывая у животного орхит. Антигены. Антигенная структура Т. pallidum сложная. Она связана с белками наружной мембраны, липопротеидами. Последние являются перекрестно реагирующими антигенами, общими для человека и крупного рогатого скота. Они используются в качестве антигена в реакции Вассермана для серодиагностики сифилиса.

Патогенность и патогенез

К факторам вирулентности бледной трепонемы относят белки наружной мембраны и ЛПС, проявляющие свои токсические свойства после освобождения из клетки. Вместе с тем, по-видимому, способность трепонемы при делении образовывать отдельные фрагменты, проникающие вглубь тканей, также можно отнести к факторам вирулентности. В патогенезе сифилиса различают три стадии. При первичном сифилисе наблюдается образование первичного очага - твердого шанкра в месте входных ворот инфекции, с последующим проникновением в регионарные лимфоузлы, где возбудитель размножается и накапливается. Первичный сифилис продолжается около 6 недель. Вторая стадия характеризуется генерализацией инфекции, сопровождающейся проникновением и циркуляцией возбудителя в крови, что сопровождается кожными высыпаниями. Продолжительность вторичного сифилиса у нелеченых больных колеблется в пределах 1-2 лет. В третьей стадии обнаруживаются инфекционные гранулемы (гуммы, склонные к распаду), локализующихся во внутренних органах и тканях. Данный период у нелеченых больных продолжается несколько лет и заканчивается поражением ЦНС (прогрессивный паралич) либо спинного мозга (спинная сухотка).

Иммунитет

При сифилисе имеет место гуморальный и клеточный иммунный ответ. Образующиеся антитела не обладают протективными свойствами. Клеточный иммунный ответ связан с фиксацией возбудителя и образованием гранулем. Однако элиминации трепонем из организма при этом не происходит. Вместе с тем неблагоприятные условия среды индуцируют образование трепонемами цист, которые локализуются в стенке кровеносных сосудов. Полагают, что это свидетельствует о переходе заболевания в стадию ремиссии. Наряду с цистами трепонемы образуют L-формы. При сифилисе формируется ГЗТ, которая может быть выявлена кожно-аллергической пробой с убитой взвесью трепонем. Полагают, что проявление третичного периода сифилиса связано с ГЗТ.

Экология и эпидемиология

Сифилис - типично антропонозная инфекция. Болеют только люди, которые являются резервуаром инфекции в природе. Передача инфекции происходит половым путем и значительно реже - через белье и другие предметы. Во внешней среде (воздух) трепонемы быстро погибают.

Сифилис и другие трепонематозы

Сифилис - хроническая инфекционная венерическая болезнь человека, имеет циклический прогрессирующее течение, поражает кожу, слизистые оболочки, внутренние органы и нервную систему. Возбудителем заболевания является Treponema pallidum.Различают три основные периоды развития сифилиса, методы лабораторной диагностики которых имеют свои особенности. В ранний период болезни материалом для лабораторной диагностики служит выделение из твердого шанкра, пунктат с лимфатических узлов, соскобы с розеол, сифилид подобное. При вторичном и третичном периодах исследуют сыворотку крови и ликвор.В связи с тем, что выделение чистых культур трепонем в обычных бактериологических лабораториях невозможно, во время первичного периода болезни (редко позже) проводят бактериоскопический метод диагностики. Начиная с вторичного периода, используют, в основном, серологические методы.

Бактериоскопическое исследования

Перед взятием патологического материала сначала сифилитическую язву протирают ватным тампоном, для удаления сального налета и контаминуючои микрофлоры. Затем дно твердого шанкра раздражают скальпелем или металлической лопаточкой или энергично сжимают язву с боков пальцами в резиновой перчатке к выделению раневого экссудата. При небольшомколичества прозрачной жидкости ее можно внести в каплю 0,85% раствора хлорида натрия. При невозможности взять материал со дна шанкра (фимоз, рубцевание язвы и др.) проводят пункцию регионарных лимфатических узлов.Каплю жидкости из язвы или пунктата наносят на тонкое предметное стекло (1,1-1,2 мм), накрывают покровным стеклом и исследуют в темном поле зрения (краще!), или с помощью фазово-контрастного или аноптрального микроскопа.Бледная трепонема в темном поле зрения имеет вид слегка блестящей тонкой нежной спирали с крутыми равномерными округлыми первичными завитками. Движения плавные, тем она изгибается под углом. Но особенно характерные для нее Маятникообразные колебания. Возбудитель сифилиса необходимо отличать от Treponema refringens (что колонизирует наружные половые органы), которая толще, грубее, с неравномерными крупными завитками и имеет активные беспорядочные движения, но не сгибается. Трепонемы фузосп-ирохетозного симбиоза отличаются тонким рисунком, пологими завитками и беспорядочным движением.При диагностике ротового сифилиса бледную трепонему следует дифференцировать и от зубных трепонем, особенно Т. dentium, а также от Т. buccalis. Первую из них вообще трудно отличить от сифилитического. Она, правда, короче, имеет 4-8 острых завитков, маятникообразное движение отсутствует. Т. buccalis толще, имеет грубые первоначальные завитки и беспорядочное движение.При любых сомнениях нужно учитывать, что все сапрофитные трепонемы, в отличие от бледной, хорошо окрашиваются анилиновыми красителями. Они не проникают в лимфатические узлы, поэтому исследования пунктатов имеет большую диагностическую ценность. Выявление в пунктате лимфатических узлов типовых трепонем беспрекословно подтверждает диагноз сифилиса.Итак, темнопольная исследования надавленные капли является наилучшим методом выявления возбудителя сифилиса. Его преимущества заключаются в том, что материал исследуют быстро, а морфология трепонем в живом состоянии наиболее характерна. Тушови мазки по методу Бурри теперь не используют.В случае невозможности провести исследование в темном поле зрения можно использовать различные методы окрашивания. Бледная трепонема плохо воспринимает анилиновые красители. Из многих предложенных способов окраски лучшие результаты получают при использовании окраски по Романовеьким-Гимзе. Изготовленные мазки фиксируют метиловым спиртом или в смеси Никифорова. Четкость результаты получают, когда краску Романовского-Гимзы наливают в препарат. Для этого в чашку Петри помещают обломки спичек, на них помещают предметное стекло мазком вниз и наливают краситель до тех пор, пока он смочите мазок. Время окраски при этом удваивают. При микроскопии бледные трепонемы имеют нежно-розовый цвет, а другие виды трепонем окрашиваются в синий или сине-фиолетовый цвет.Можно использовать и метод серебрения Морозовым. Трепонемы полностью сохраняют свои морфологические особенности и выглядят под микроскопом коричневыми или почти черными. Но посеребренные препараты долго не хранятся. В последнее время методы окрашивания трепонем применяют редко.Если начато лечение сифилиса химиопрепаратами, выявить возбудитель в патологических материалах даже с помощью темного поля зрения практически не удается. При получении отрицательного анализа его необходимо повторить.

Серологическая диагностика сифилиса

При проведении серологических реакций теперь используют следующие унифицированные в Украине методы исследований: реакции связывания комплемента (РСК), иммунофлуоресценции (РИФ), иммобилизации трепонем (PIT), микрореакцию преципитации (МПР) и иммуноферментный анализ (ИФА).На протяжении многих лет основной и наиболее распространенной реакцией считалась реакция связывания комплемента или реакция Вассермана (РВ, RW). Для ее постановки используют сыворотку крови больного сифилисом и спинномозговую жидкость при поражении нервной системы.Методика постановки реакции Вассермана не отличается от техники проведения РСК. Разница лишь в том, что для РО используют не только специфический трепонемный, а неспецифический кардиолипиновый антиген.l Взятие 5-10 мл крови из локтевой вены проводят натощак или не ранее 6 часов после приема пищи. Нельзя брать кровь у больных с повышенной температурой, после употребления алкоголя и жирной пищи, у беременных женщин за 10 дней до родов и рожениц. Добытую из крови сыворотку прогревают при температуре 56 ° С в течение 30 мин для инактивации собственного комплемента. РО обязательно ставят с двумя антигенами: специфическим и неспецифическим.Специфический ультраозвучений трепонемный антиген готовят из культур бледных трепонем (штамм Рейтера), выращенных в пробирках и подверженных действию ультразвука. Его выпускают в виде лиофильно высушенного порошка. Неспецифический кардиолипиновый антиген готовят путем спиртового экстрагирования липидов с бычьего сердца и очистки от балластных смесей, расфасовывают в ампулы по 2 мл. Для введения антигена в РО его титруют согласно данной инструкции. Непосредственно перед постановкой РВ проводят титрование комплемента и гемолитической сыворотки по такой же схеме, как и в РСК. Реакцию Вассермана ставят как качественным, так и количественным методом. Качественную реакцию проводят в трех пробирках с двумя антигенами по обычной схеме.Результаты реакции оценивают по 4 плюсовой системе: положительная реакция - когда есть полная или значительная задержка гемолиза (4 +, 3 +); слабоположительная реакция - частичная задержка гемолиза (2 +); сомнительная реакция - незначительная задержка гемолиза (1 +). В случае возникновения полного гемолиза РО считают отрицательной.Каждую сыворотку, которая дала положительную качественную реакцию, необходимо исследовать и количественным методом с последовательным ее разведением от 1:10 до 1:640.Титром исследуемой сыворотки (титр реагинов) считают то максимальное ее разведение, при котором наступает полная (4 +) или значка (3 +) задержка гемолиза. Количественный метод постановки РО имеет важное значение для оценки эффективности лечения сифилиса. Быстрое снижение титра реагинов указывает на успешную терапию. Если титр сыворотки долго не снижается, это свидетельствует об отсутствии эффективности применяемых препаратов и необходимость изменить тактику лечения.При пилозри на серонегативный первичный сифилис или скрытый, третичный или врожденный, рекомендуют ставить реакцию Вассермана на холоде по той же схеме. В случае подозрения на нейросифилис РО проводят со спинномозговой жидкостью, которую инактивируют, поскольку она не содержит собственного комплемента. В реакцию вводят неразведенный ликвор и в разведениях 1:2 и 1:5.Реакция Вассермана становится положительной через 2-3 недели после появления твердого шанкра. При вторичном сифилисе она выпадает положительной в 100% случаев, в третичном - в 75%.Кроме того, в комплексе серологических реакций (КСР) как скрининг-тест используют микрореакцию преципитации с плазмой крови или инактивированной сывороткой.

Микрореакция преципитации

Микрореакцию преципитации ставят с кардиолипиновым антигеном. Принцип реакции заключается в том, что при добавлении к плазме или сыворотке крови больного сифилисом эмульсии кардиолипинового антигена образуется преципитат (комплекс антиген-антитело), который осаждается в виде хлопьев белого цвета. Пользуются такой методике: в лунку пластины вносят пипеткой три капли плазмы (или инактивированной сыворотки), затем добавляют одну каплю эмульсии стандартного кардиолипинового антигена. Компоненты реакции смешивают встряхиванием пластины в течение 5 мин, после чего добавляют три капли 0,9% раствора хлорида натрия и оставляют при комнатной температуре еще на 5 мин. Обязательном контроле со слабоположительный сывороткой крови. Результаты оценивают невооруженным глазом над искусственным источником освещения. При появлении в лунке крупных хлопьев реакцию считают положительной (4 +, 3 +), средних и мелких - как слабоположительные (2 +, 1 +). При отрицательном результате преципитат не образуется.Микрореакцию преципитации можно проводить и количественным методом для установления титра преципитирующих антител и оценки на этой основе эффективности лечения. Более высокие титры МРП получают с плазмой, чем с сывороткой. За рубежом аналогом МРП с сывороткой больного является VDRL (Veneral disease research laboratoiy), а с плазмой - RPR (Rapid plasma reagin).

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

К группе специфических реакций, которые широко употребляются для серологической диагностики сифилиса, относится непрямая реакция иммунофлюоресценции. Как антиген, в ней используют взвесь патогенных бледных трепонем штамма Никольса из паренхимы яичек кролика на 7-й день после заражения. Реакцию ставят в двух модификациях: РИФ-АБС и РИФ-200. В первом варианте используют сорбент антител (соникат) - ультраозвучений трепонемный антиген для РСК. Его выпускает Каунасское предприятие по производству бактерийных препаратов (Литва). При варианте РИФ-200 сыворотку больного разводят в 200 раз с целью снять влияние групповых протитрепонемних антител.Постановку РИФ-АБС проводят на тонких, хорошо обезжиренных предметных стеклах. На обратной стороне стекол стеклорезом обозначены 10 кружочков диаметром 0,7 см. В рамках кружка на стекло наносят антиген - взвесь бледных трепонем - в таком количестве, чтобы в поле зрения их было 50-60. Мазки высушивают на воздухе, фиксируют над пламенем и 10 мин в ацетоне. В отдельную пробирку вносят 0,2 мл сорбента (соникату) и 0,5 мл сыворотки крови больного, хорошо перемешивают. Смесь наносят на мазок (антиген) так, чтобы равномерно его покрыть, выдерживают 30 мин во влажной камере при 3 7 ° С (II фаза реакции). После этого мазок промывают фосфатным буфером, высушивают и наносят на него антишобулинову флуоресцентных сыворотку на 30 мин, ставят во влажную камеру при 37 ° С (II фаза). Препарат вновь промывают фосфатным буфером, высушивают и исследуют под люминесцентным микроскопом.При положительной реакции бледные трепонемы излучают золотисто-зеленый свет, при отрицательной - не светятся.Техника постановки РИФ-200 такое же, как и РИФ-АБС, только сыворотку крови больного предварительно разводят в 200 раз фосфатным буфером. При проведенииреакции иммунофлюоресценции со спинномозговой жидкостью больного сифилисом нервной системы используют РИФ-ц и РИФ-10, т.е. ликвор вводят в реакцию неинактивованим и разведенным, или разведенным 1:10.

Реакция имобилизации бледных трепонем (PИT)

Реакция имобилизации бледных трепонем (PИT) основан на феномене потери их подвижности в присутствии иммобилизирующие протитрепонемних антител сыворотки больного и комплемента в условиях анаэробиоза. Как антиген в реакции используют взвесь бледных трепонем из тестикулярной ткани кролика, зараженного лабораторным штаммом Никольса. Взвесь разводят стерильным 0,85% раствором хлорида натрия так, чтобы в поле зрения было 10-15 спирохет.Для проведения реакции в стерильной пробирке смешивают 0,05 мл сыворотки крови больного, 0,35 мл антигена и 0,15 мл комплемента. Опыт сопровождают контролями сыворотки, антигена и комплемента. Пробирки помещают в анаеростат, создают анаробни условия и выдерживают в термостате 18-20 ч при температуре 35 ° С. Затем из каждой пробирки готовят препарат надавленные капли, подсчитывают не менее 25 трепонем и отмечают, сколько из них подвижных и сколько неподвижных. Процент специфической иммобилизации бледных трепонем подсчитывают по формуле: х = (А-В) / В * 100, где X - процент иммобилизации, А - число подвижных трепонем в контрольной пробирке, В - число подвижных трепонем в опытной пробирке. Реакция считается положительной, когда процент иммобилизации составляет 50 и более, слабоположительный - от 30 до 50, сомнительной - от 20 до 30 и отрицательной - от 0 до 20.В практических лабораториях используют более простой меланжерний метод PIT за М.М. Овчинниковым. Анаэробные условия опыта создаются помещением реагирующей смеси (сыворотки, антиген, комплемент) в меланжеры, оба конца которого закрывают резиновым кольцом. Меланжерна методика позволяет обойтись без сложного оборудования и аппаратуры для создания анаэробиоза, но дает такие результаты, которые не посту паються классической микроанаеростатний методике.Реакции иммобилизации трепонем и иммунофлуоресценции считают наиболее специфичными в серологической диагностике сифилиса. И все же, PIT, несмотря на ее специфичность, не рекомендуют для использования в широкой практике из-за трудоемкости постановки.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Иммуноферментный анализ (ИФА) проводят как с кадриолипиновим антигеном (неспецифическая, отборочная реакция), так и трепонемным (специфическая реакция), которая подтверждает диагноз сифилиса.Принцип непрямого метода ИФА заключается в том, что в антигена, адсорбированного на твердой фазе в лунках планшета вносят исследуемую сыворотку. Если она содержит антитела против трепонем, образуется комплекс антиген-антитело (II фаза). После отмывания несвязанных неспецифических антител в лунки вносят антиглобулинову сыворотку, конъюгированные с ферментом (чаще всего с пероксидазой хрена). Конъюгат прочно присоединяется к комплексу антиген-антитело (II фаза).После отмывания несвязанного конъюгата в лунки добавляют окрашивающий субстрат ОФД - ортофенилендиамин (III фаза). Пероксидазную реакцию останавливают, добавляя серную кислоту. Для контроля ставят такие же пробы с положительным и заведомо отрицательной сыворотками.Учет результатов анализа проводят с помощью фотометра, который определяет оптическую плотность в двухволновом режиме (492 нм и 620 нм). Для постановки реакции ензиммичених антител, кроме фотометра, нужны одно-и восьмиканальные автоматические пипетки с полипропиленовым наконечником и соответствующие наборы диагностических тест-систем.Метод ИФА находит широкое применение в серологической диагностике сифилиса. Он одинаково эффективен для выявления болезни в инкубационном периоде (через 1-2 недели после инфицирования), при клинических проявлениях болезни и скрытых его формах. Очень часто ИФА используют при скрининговых обследованиях населения, особенно на станциях переливания крови.В лабораторной практике иногда применяют также реакцию иммунной прилипания (РИП) и реакцию непрямой гемагглютинации (РНГА). Первая из них основывается на том, что патогенные тестикулярные трепонемы штамма Никольса при смешивании с сывороткой больного в присутствии комплемента и эритроцитов человека прилипают к поверхности красных кровяных телец. РНГА достаточно широко используется для диагностики сифилиса благодаря своей методической простоте. Она становится положительной уже через три недели после заражения. Положительный результат реакции остается годами после выздоровления. Аналогом этой реакции за рубежом является ТРНА (Treponema pallidum haemoagglutination).

Бледная трепонема - это бактерия рода Treponema, вызывающая инфекционное заболевание сифилис. Длина ее составляет от 8 до 20 мкм, ширина - от 0,25 до 0,35 мкм. Имеет форму спирали и напоминает штопор с количеством завитков 8–12 штук. Такой тип строения называют спирохетой, поэтому эта бактерия известна также как бледная спирохета.

Длинное тонкое тело позволяет микробу легко проникать в организм человека сквозь слизистые оболочки. В основном заражение происходит через половые органы.

Что представляет собой трепонема

Бледная трепонема была открыта в 1905 г. немецкими учеными Гофманом и Шаудином. При исследовании Treponema pallidum (лат. название, используется также написание T. pallidum) не обнаруживается методом окрашивания Грама, поэтому за бактерией закрепилось определение «бледная» (лат. pallidum). Имеет 4 подвида, каждый из которых несет угрозу здоровью человека:

Трепонема паллидум имеет тело, покрытое слизистой бесструктурной капсулой, трехслойную клеточную стенку, органеллы (вакуоли, рибосомы, мезосомы), цитоплазму. Концы у нее обычно заостренные, на них имеются выросты-блефаропласты, на которых располагается около 10 фибрилл (нитевидных структур) в виде пучков. Благодаря сокращениям клетки и имеющимся фибриллам бледная спирохета быстро передвигается. На пути к своей цели она совершает разнообразные движения: сгибательные, поступательные, вращательные, винтообразные и т. д.

При неблагоприятных условиях меняются формы бледной трепонемы, она приобретает вид цист и L-форму:

В L-форме трепонемы становятся шаровидными, останавливается их размножение и истончается клеточная стенка, однако рост и синтез ДНК продолжается.
Цисты покрыты защитной оболочкой и могут долго находиться в организме человека в латентном состоянии. Когда условия меняются на благоприятные, цисты становятся зернами, а затем приобретают привычную форму.

Трепонема паллидум чувствительна к ультрафиолету, боится щелочи, уксуса, спирта. Проявляет устойчивость к низким температурам (выдерживает замораживание до 1 года), но при нагревании свыше 50 °C гибнет в течение 15–20 минут. Вне организма человека может прожить не более 3 суток. Является строгим анаэробом, т. е. для энергетического обмена ей не требуется свободный кислород. Сопротивляемость цист и L-формы в несколько раз сильнее.

Признаки сифилиса

Попав в организм человека через слизистую, бактерия продолжает перемещение по лимфатическим и кровеносным сосудам, затем оседает в тканях. Первые признаки заражения обычно появляются через 20–30 дней после проникновения микроба в организм, но иногда это происходит не раньше чем через 3–4 месяца. Выделяют несколько стадий заболевания: первичный сифилис, вторичный и т. д. Каждая из них имеет характерные симптомы.

Первичный сифилис - стадия, возникающая сразу после заражения, симптомы становятся заметны спустя 10–90 дней. Больной может испытывать слабость, головную боль, боль в костях и мышцах, повышение температуры. Иногда ухудшения самочувствия не наблюдается. Часто увеличиваются лимфоузлы. На месте проникновения белой спирохеты образуется сифилома или - небольшой плотный узел диаметром до 1 см, постепенно трансформирующийся в язву.

Шанкр бывает единичный или в количестве нескольких штук и возникает не только на слизистых оболочках, но и на кожных покровах рук, бедер, живота и т. д. Шанкры имеют разновидности, называемые аномальными, их наличие часто сбивает с толку при постановке диагноза:

Вторичная стадия начинается спустя 3 месяца после того, как возбудитель сифилиса проник в организм. Ее длительность может достигать 5 лет. Периодически возникают высыпания на коже (кожные сифилиды), которые проходят сами через несколько недель. Они могут иметь разный вид: белые пятна на шее (« «), гнойники, бледно-розовые пятна на боках и т. д. Зуд и температура отсутствуют. Порой наблюдается локальное облысение. Сифилиды могут поражать слизистую горла в виде ангины и фарингита.

Третичный сифилис наступает спустя несколько лет после заражения. Происходит разрушение внутренних органов, появляются характерные сифилиды на кожных и слизистых покровах. Слизистую и внутренние органы поражают гуммы - опухоли, приводящие к необратимому распаду тканей. На коже появляются бугорковые и гуммозные сифилиды (см. фото).

Выявление и лечение заболевания

Для диагностирования сифилиса проводится комплексное обследование. Сначала пациента осматривает дерматовенеролог на наличие высыпаний на коже и слизистых. Затем проводятся лабораторные исследования материала, взятого из язв и образований у больного. Могут проводиться такие исследования;

Трепонемные серологичекие тесты: РИТБ, РИФ, TPHA, ИФА, иммуноблотинг. Они позволяют выявить антитела к трепономе паллидум.
Нетрепонемные серологические тесты: реакция Вассермана, количественный тест
VDRL, тест быстрых плазменных реагинов. Определяют наличие антител к фосфолипидам тканей.
Обнаружение трепонемы в очагах поражения: ПЦР, РИФ-Тр, темнопольная микроскопия.

Важно тщательно изучить все признаки, чтобы понять, что это такое, ведь симптомы сифилиса совпадают с симптомами многих других заболеваний. Если диагноз подтвердился, назначается лечение, тип которого зависит от стадии заболевания.

Терапия базируется на приеме антибиотиков. Основой препаратов обычно являются пенициллин, тетрациклин или эритромицин. Если же у пациента третичная стадия, то применяются средства на висмуте, отличающиеся сильной токсичностью. Также может практиковаться внутримышечное введение антибактериальных препаратов, пиротерапия.

Дезинфекция предметов домашнего обихода является обязательной и помогает убить возбудитель за пределами организма зараженного. Кроме того, необходимо провести диагностику и лечение полового партнера.

Спирохета (что это такое, знают не все) - бактерия, одноклеточный организм, обладающий патогенностью для человека, то есть способный вызывать инфекционные заболевания. Наиболее опасный вид микроба — бледная трепонема, являющаяся возбудителем венерической болезни - сифилиса.

Pallidium) была открыта в 1905 г. немецкими учеными и микробиологами Э. Гофманом и Ф. Шаудином.

Особенности спирохеты

То есть не окрашивается по Граму анилиновыми красителями (метиловым фиолетовым), а только обесцвечивается. Это связано с тем, что состав клеточной стенки бактерии (оболочки) более крепкий, чем у грамположительных организмов. Это делает клетку устойчивой к действию антибактериальных веществ, будь то лекарственные препараты или содержащийся в слюне и выделениях из носовых ходов лизоцим - фермент, способный уничтожать вирусы и бактерии.

Спирохета бледная отличается от других бактерий своей длиной и необычным строением. Эти клетки закручены по спирали. Длина спирохеты варьируется от 8 до 20 мкм, что делает ее непохожей на другие бактерии. Она довольно подвижна, сокращаясь, она движется винтообразно, изгибается, словно змея. В среднем спирохета имеет около 10 завитков, по внешнему виду схожа со штопором для откупорки вина.

Клетка имеет фибриллы (похожие на жгутики элементы), позволяющие ей хорошо передвигаться, не касаясь скользких поверхностей, плавать. Фибриллы вращаются, сокращаясь, обеспечивают движение.

Клетка спирохеты покрыта наружной мембраной, под которой находится цитоплазматическая мембрана, окружающая протоплазматический цилиндр и цитоплазму. Цилиндр покрыт жгутиками, которые, находясь внутри клетки, обеспечивают ее способность сгибаться и извиваться.

Спирохета бледная является анаэробом. То есть для жизнедеятельности ей абсолютно не нужен кислород, что делает ее средой обитания, например, человеческий организм. Источники ее энергии для жизни - углеводы и аминокислоты.

Но у нее есть некоторая особенность. Дело в том, что размножаться спирохета может только при температуре 37°C при помощи деления один раз в 30 часов.

Передача заболевания происходит в основном половым путем, но можно заболеть и при близком бытовом контакте (полотенца, банные принадлежности, бритвы, зубные щетки), при переливании крови от инфицированного сифилисом человека. Также от больной матери заражается плод.

Возможность передачи возбудителя через мочу и слюну не доказана, хотя если во рту имеются язвы, теоретически там могут обитать спирохеты. Зато бактерии прекрасно живут в материнском грудном молоке, сперме.

Развитие заболевания и его периоды

В течение 3 недель после того, как бледная спирохета - возбудитель сифилиса, попала в организм, длится инкубационный период, который проходит бессимптомно. После него следует первичный период, затем вторичный и третичный.

Бактерия способна выделять эндотоксин, отравляя кровь и внутренние органы больного.

По истечении инкубационного периода в месте внедрения возбудителя образуется безболезненная язва, после чего начинается первичный период, который длится около 5-6 недель. Воспаляются лимфатические узлы.

Во вторичном периоде симптомами являются многочисленные высыпания самых различных форм на ладонях и стопах, поражается нервная система больного, внутренние органы (почки, печень, сердце).

Иммунная система пытается сдерживать размножение спирохеты, обеспечивая защитную реакцию в виде выработки антител, вследствие чего бактерия замедляет размножение. Болезнь ненадолго затихает. Но организм не в состоянии сам побороть все очаги воспаления, поэтому через некоторое время заболевание начинает прогрессировать вновь. Так может продолжаться годами, что свидетельствует о хроническом течении заболевания.

Третичная стадия характеризуется разрушением тканей и органов, образованием сифилитических рубцов, разрушением хрящевой и костной ткани. Если больной не получает лечения, то инфекция приводит к разрушению систем организма (поражение сосудов, сердечной мышцы, клапанов).

Женщина, которой не назначено лечение до 16 недель беременности, рискует потерять плод, потерять ребенка при родах либо стать матерью малыша, больного врожденным сифилисом. Если дети выживают после родов, то в первые недели их жизни проявляются симптомы первичного и вторичного сифилиса: сыпь, деформация носовых костей, глухота, выступает лоб.

Адекватное лечение

Спирохета бледная постепенно приобрела устойчивость ко многим видам антибиотиков. На нее не действуют обычные пенициллины, макролиды. Бактерия может внедряться в клетки, выстилающие внутреннюю оболочку сосудов, что делает ее недосягаемой для лекарственных препаратов.

Для лечения применяют бензатинбензилпенициллин, который может быть заменен на эритромицин или тетрациклин.

Спирохета бледная при первичном или успешно устраняется при адекватном лечении. Заболевание считается излеченным в случае серонегативации и отсутствии симптомов в течение года.

В наше время встречается редко, развивается при отсутствии лечения. Трудно поддается терапии, возникающие нарушения необратимы, приводят к инвалидности, даже смерти.

Профилактика заражения

Теперь, когда стало понятно спирохета - что это такое, какую опасность она представляет, стоит задуматься о мерах предупреждения заражения.

В первую очередь следует вести разборчивую сексуальную жизнь, используя защитные методы контрацепции - презервативы.

Использование инъекционными наркоманами общих шприцев, емкостей для приготовления наркотиков - глобальная проблема, которую необходимо решать на государственном уровне. Это может привести не только к распространению сифилиса, но и других опаснейших заболеваний (ВИЧ, гепатит С).

Беременные женщины при постановке на учет обязательно должны пройти исследования, чтобы исключить опаснейшее для плода заболевание.

Соблюдение моральных принципов, элементарных правил гигиены - вот основные действия, не допускающие попадания в организм возбудителей венерических заболеваний. Культура правильного и адекватного поведения должна вырабатываться с детства, быть неотъемлемой частью жизни в обществе.